Вирусы гепатита С и В имеют различные внепеченочные проявления, в частности, поражения кожи, почек, сердечно-сосудистой системы, легких и щитовидной железы, слюнных желез и другие [1,4]. Изменения со стороны полости носа изучено недостаточно. Частота встречаемости носового кровотечения при заболеваниях печени варьирует от 1% до 13,4% [3]. В данной статье рассмотрены изменения местного иммунитета слизистой оболочки носа для выявления возможных механизмов ее повреждения.

Цель исследования. Определить изменения местного иммунитета слизистой оболочки носа при хронических вирусных гепатитах.

Пациенты и методы исследования.

В исследовании принимали участие 18 человек от 30 до 60 лет, разделенных на 3 группы:

-   первая группа состояла из 6 человек с хроническим вирусным гепатитом С, из них 3 человек с циррозом печени;

-     вторая группа составила 6 пациентов с хроническим вирусным гепатитом В, из них 4 пациента с циррозом печени;

-   третья группа – группа контроля, включала 6 человек, в сыворотке которых вирусных маркеров гепатита не было обнаружено.

Пациентам проводился скрининг гемоконтактных гепатитов: HBsAg и антитела к HCV исследовали методом иммуноферментного анализа с помощью тест-системы ЗАО «Вектор-Бест» III поколения.

Суспензию клеток из биопсийного материала получали с помощью механического дезинтегратора Medimachine (BD) для определения местного субсостава лимфоцитов. Использовали антитела: HLA DR-FITC, CD4-PE, CD3-ECD, CD56-PC5.5, CD25-PC7, CD8-APC, CD19-APC-AF700, CD45-APC-AF750 (Beckman Coulter).

Популяцию лимфоцитов оценивали как CD45+brightSSCdim клетки. Пробы рассчитывали на проточном цитофлюориметре Navios (Beckman Coulter) в многоцветном протоколе. Анализ  образца осуществлялся при наборе не менее 200 событий в лимфоцитарном гейте. Результат считался достоверным, если набиралось более 25 событий в регионе субпопуляции лимфоцитов.

Результаты исследования и их обсуждение.

В субпопуляционном составе лимфоцитов слизистой оболочки носа выявлено преобладание Т-лимфоцитов на фоне низкого значения субпопуляций В- и NK-лимфоцитов, изменение соотношения хелперных и цитотоксических субпопуляций Т-лимфоцитов с увеличением последних,  что характерно для местного иммунитета [2].

При анализе результатов исследования относительного количества субпопуляций лимфоцитов в слизистой оболочке носа у пациентов с хроническими гепатитами с результатами контрольной группы был установлен ряд достоверных отличий (Табл.1).

Таблица 1 Относительное количество субпопуляций лимфоцитов в слизистой оболочке носа пациентов с хроническими гепатитами В и С и контрольной крупы (%).

Показатели	Хронический гепатит N=12 1 и 3 квартили, медиана	Контрольная группа N=6 1 и 3 квартили, медиана
CD3+ (Т-лимфоциты)	87-93 91	78-93 85
CD3+CD4+ (Т-хелперы)	17-41	33-36

	27	35
CD3+CD8+ (Т-киллеры)	49-72 65	42-57 48
Соотношение CD4+/CD8+	0,24-0,8 0,4	0,6-0,75 0,6
СD3+CD56+ (ТNK-клетки)	5,5-8,6 6,9	4,1-7,4 7,0
CD19+ (В-лимфоциты)	1,8-3,1 2,5	2-9 3,3
CD 25+ (рецептор ИЛ-2)	2,1-3,1 2,7	2,2-5,2 3,5
CD3-CD56+ (NK-клетки)	4,1-7,2 5,0	3,7-12,1 6,4
HLA DR+	18-34 29*	13-23,4 19*
CD3+HLA DR+ (активир. Т-клетки)	12,4-34,4 25,7*	10,0-11,6 10,2*
CD56+HLA DR+ (активир. NK-клетки)	4,4-7,5 5,8*	2,6-3,5 2,7*

* - статистически достоверные отличия, p<0,05.

   

В биоптатах слизистой носа группы пациентов с хроническими гепатитами В и С по сравнению с нормой определена склонность к увеличению относительного количества цитотоксических Т-лимфоцитов (60,2±14,4% против 49,8±7,4%). Статистически установлено достоверное повышение относительного количества HLADR+ лимфоцитов (30,4±11,8%  против 18,2±4,2, p<0,05) за счет повышения относительного количества активированных Т- и NK-лимфоцитов (26,6±14,6% против 11,7±3,4% и 6,2±2,2 против 2,8±0,6, p<0,05).

При сравнении результатов исследования относительного количества субпопуляций лимфоцитов в слизистой оболочке носа между подгруппами пациентов с хроническими вирусными гепатитами С, В и здоровыми лицами (группы 1, 2, 3) было выявлено (Табл.2):

Таблица 2 Сравнение относительного количества субпопуляций лимфоцитов слизистой носа в подгруппах пациентов с хроническими вирусными гепатитами С, В и здоровыми лицами (%).

Показатели	Группа 1 N=6 1 и 3 квартили, медиана	Группа 2 N=6 1 и 3 квартили, медиана	Группа 3 N=6 1 и 3 квартили, медиана
CD3+ (Т-лимфоциты)	86-93 88,9	92-93,5 93	78-93 85
CD3+CD4+ (Т-хелперы)	15-37,5 22,5	24-36 31	33-36 35
CD3+CD8+ (Т-киллеры)	44-75,5 66,5	55,5-67 62	42-57 48
Соотношение CD4+/CD8+	0,2-0,94 0,3	0,37-0,65 0,5	0,6-0,75 0,6
СD3+CD56+ (ТNK-клетки)	4,4-12 5,8	6,9-7,3 7,1	4,1-7,4 7,0
CD19+ (В-лимфоциты)	2,1-3,1 2,0	2,1-3,1 3,0	2-9 3,3
CD 25+ (рецептор ИЛ-2)	2,1-3,1 2,1	2,8-3,0 2,9	2,2-5,2 3,5
CD3-CD56+ (NK-клетки)	5,1-11,2 7,3	4-4,5 4,1	3,7-12,1 6,4
HLA DR+	27,0-43,5 29,5*¥	13-25 16*	13-23,4 19¥

CD3+HLA DR+ (активир. Т- клетки)	21,5-44,1 31,9*¥	11,1-22,5 13,7*	10,0-11,6 10,2¥
CD56+HLA DR+ (активир. NK- клетки)	6,5-9,4 6,8*¥	3,4-4,3 4,0*	2,6-3,5 2,7¥

* - статистически достоверные отличия между группами пациентов с гепатитами В и С, p<0,05.

¥ - статистически достоверные отличия между группой пациентов с гепатитом С и группой здоровых лиц.

 

В биоптатах слизистой носа в подгруппе пациентов с гепатитом С по сравнению с результатами пациентов с гепатитом В выявлено статистически достоверное повышение относительного количества HLADR+ лимфоцитов (35,5±13,0% против 18,2±4,2%, p<0,05) за счет повышения относительного количества популяций активированных Т- и NK-лимфоцитов (31,9±15,9% против 17,8±8,9% и 7,7±1,9% против 3,7±0,7% соответственно, p<0,05). При этом, значения в подгруппе пациентов с гепатитом В были сопоставимы с нормальными, а значения в подгруппе пациентов с гепатитом С превышали таковые (HLA DR+: 35,5±12,9% против 18,2±4,2%, CD3+HLA DR+: 31,9±15,9% против 11,7±3,4%, CD56+HLA DR+: 7,7±1,9% против 2,8±0,6, p<0,05).

Заключение.

У пациентов с гепатитом С отмечается повышение количества активированных Т- и NK- лимфоцитов в слизистой носа, свидетельствующее о выраженном иммунном ответе. Возможно это связано с участием клеток специфического иммунитета, прежде всего CD8+ Т-лимфоцитов, в повреждении слизистой оболочки носа у пациентов с хроническим гепатитом С.

У пациентов с хроническим вирусным гепатитом В субпопуляционный состав лимфоцитов слизистой оболочки был соизмерим с нормой.

 

Список литературы

1.     Байкова Т.А., Лопаткина Т.Н. Многообразие внепеченочных проявлений хронических вирусных гепатитов В и С, общие принципы лечения // Терапевтический архив. – 2013. - №4. - С. 106-107.

2.     Давыдова Н.И., Бычкова Н.В., Кобиашвили М.Г., Михайлова И.А. Анализ показателей местного иммунитета при некоторых вариантах течения и исхода хронического воспаления верхних отделов желудочно-кишечного тракта. // Медико-биологические и социально-психологические проблемы безопасности в чрезвычайных ситуациях. – 2013. - N1. - с. 60-66.

3.     Epistaxis: Study of aetiology, site and side of bleeding/ Urvashi Razdan, [et al.]// Indian Journal of Medical Science -1999 – Vol.53, Issue 12 - p.545-552.

4.     Lohr H.F., Goergen B., Buschenfelde K.H., Gerken G. HCV replication in mononuclear cells stimulates anti-HCV- secreting B cells and reflects nonresponsiveness to interferon-alfa // J. Med. Virol., 1995. - Vol. 46 - №4. - P.314- 321.