30 марта 2016г.
Известно, что в настоящее время основной причиной смертности в различных странах мира являются различные сердечно-сосудистые заболевания: инфаркт миокарда, инсульт и т.д. [5, 12, 14]. В последние годы наблюдается учащение случаев этих патологических состояний. Одним из основных методом лечения является проведение лизиса тромбов в сосудах. Однако тромболитическая терапия у пациентов не всегда эффективна. Это связано с тем, что в сосуде, где располагается тромб или нет кровотока или же он резко снижен. Поэтому введение тромболитических агентов в сосудистое русло не может быть достаточно результативным, тромболитик не может достичь тромба. Другим недостатком данного вида терапии является то, что лекарственные препараты приходится вводить в достаточно высоких концентрациях. Причем существенная часть фибринолитика блокируется многочисленными ингибиторами крови, и клиницист не всегда знает уровень этого потенциала, который может отличаться у пациентов существенно. Фибринолитическая терапия может сопровождаться различными осложнениям: кровотечения, развитие инсульта, аллергические реакции и др. Одним из направлений регуляции гемостаза является использование пептидов, которые повышают протеолитический потенциал лейкоцитов [1, 11, 21].
По нашему мнению перспективным была бы доставка тромболитика к тромбу с помощью собственных клеток. Ведь известно, что количество нейтрофилов в тканях около тромба возрастает в несколько десятков раз [4, 16, 24]. В последние годы было показано, что гранулоциты крови обладают фибринолитическим потенциалом и в определенных ситуациях могут помочь в лизисе сгустка [3, 5, 20, 21]. Однако уровень данного потенциала не очень высокий. Причем очень часто нарушения в системе гемостаза сочетается с изменением микроциркуляции [6, 7, 25].
Цель исследования: повышение эффективности проведения тромболитической терапии и снижение её побочных эффектов.
Для решения этой цели решалось несколько задач: во-первых, необходимо было дополнительно нагрузить нейтрофилы фибринолитиками для усиления их фибринолитической активности, во-вторых, повысить тропность нейтрофилов к фибрину, чтобы клетки целенаправленно двигались к тромбу и в третьих, заставить нейтрофилы выбросить тромболитики в определенном месте при контакте с тромбом.
Полученные результаты.
У пациента выделяется лейкоцитарная взвесь, которую можно получить несколькими способами. Наиболее простой способ – это снять лейкоцитарную пленку после центрифугирования цельной крови, эритроцитарная масса возвращается обратно пациенту. Наиболее совершенный способ это фильтрационный лейкоцитаферез – фильтрация гепаринизированной крови через нейлоновые фильтры или же применение сепараторов непрерывного действия. Увеличить выход лейкоцитов можно введением до забора крови кортикостероидов. Полученная лейкоцитарная взвесь, основную массу клеток которой составляют нейтрофилы, инкубируется со стрептокиназой или другим фибринолитическим агентом по разработанной нами технологии. In vitro было показано, что после обработки клеток стрептокиназой, фибринолитическая активность гранулоцитов возрастает в 100-200 раз [2, 9] . Затем для усиления процесса миграции и адгезии к сгустку на мембрану нейтрофилов по оригинальной методике пришиваются антифибриновые моноклональные антитела. Нами установлено, что тропность таких клеток к фибрину возрастает в 7-8 раз. При взаимодействии данных рецепторов с фибрином происходит выброс как собственных гранул, а также и искусственно введенных.
В дальнейшем в экспериментах на кроликах было показано, что после введения активированных и нагруженных лейкоцитов большая их часть скапливается в районе тромба. Известно, что эти клетки способны самостоятельно перемещаться в тканях, поэтому они не зависят от наличия или отсутствия кровотока. При взаимодействии антифибриновых антител с тромбом происходила их активация, что приводило к выбросу, как собственных ферментов, так и гранул с тромболитиками, которыми мы их нагрузили. Происходило достаточно быстрое разрушение тромба. Причем доза фибринолитика используемая для лечения на порядок меньше, чем при проведении стандартной методики его введения. Мы считаем, что данный метод может в дальнейшем найти свое применение как индивидуально, так и при массовом поражении людей [10, 18]. Также он может найти свое место при нарушениях кровообращения [14, 16], острой дыхательной недостаточности (респираторный дистресс взрослых) [15, 19], при отморожениях [23, 25], при ожогах [5, 8], при тяжелых отравлениях [10, 22] и у пациентов с повышенным риском развития нарушений в системе гемостаза [13, 17].
Список литературы
1. Исследование системы крови в клинической практике. / Под ред. Г.И. Козинца и В.А. Макарова. - М.: Триада-Х, 1997. – 280 с.
2. Краденов А.В., Степанов А.В. Способ активации лейкоцитов крови человека. Патент на изобретение RUS 1689855. 26.06.1989.
3. Мельникова С.Л., Степанов А.В. Лейкоцитарный фибринолиз у онкологических больных // Фундаментальные исследования. – 2013. - №3-1. – С. 117-120.
4. Лобанов С.Л., Степанов А.В., Лобанов Л.С. Современные подходы к лечению острого панкреатита. – Чита: Деловое Забайкалье, 2008. - 160 с.
5. Практическая коагулология / Под ред. А. И. Воробьева. - М.: Практическая медицина, 2011. - 192 с.
6. Подойницына М.Г., Цепелев В.Л., Степанов А.В. Изменение микроциркуляции при дермальных ожогах // Фундаментальные исследования. - 2015. - № 1-9. - С. 1893-1896.
7. Подойницына М.Г., Цепелев В.Л., Степанов А.В. Клиническая эффективность магнитоплазменной терапии ожогов кожи // Забайкальский медицинский вестник. - 2015. - № 2. - С. 99-102.
8. Подойницына М.Г., Цепелев В.Л., Степанов А.В. Применение физических методов лечения ожогов кожи // Современные проблемы науки и образования. – 2015. – № 5; URL: www.science-education.ru/128-22156.
9. Степанов А.В., Краденов А.В., Цыбиков Н.Н. Способ определения фибринолитической активности лейкоцитов. Патент на изобретение RUS 1704078. 01.06.1989.
10. Степанов А.В., Любин А.В., Перепелицын Н.И., Тарасова О.А., Малежик М.С. Медицинская защита при радиационных и токсических поражениях. - Чита : ИИЦ ЧГМА, 2011. - 343 с.
11. Степанов А.В. Пептидные регуляторы из сумки Фабрициуса // Забайкальский медицинский вестник. - 2004. - № 4. - С. 97-101.
12. Степанов А.В. Особенности анестезии у пациентов пожилого и старческого возраста // Забайкальский медицинский вестник. - 1996. - № 1. - С. 41-43.
13. Степанов А.В. Интенсивная терапия при черепно-мозговой травме // Забайкальский медицинский вестник.- 2002. - № 2. - С. 22-27.
14. Степанов А.В. Острые нарушения функции кровообращения. – Чита: ИИЦ ЧГМА, 2008. - 36 с.
15. Степанов А.В. Острые нарушения функций дыхания. Чита: ИИЦ ЧГМА, 2008. - 66 с.
16. Степанов А.В. Интенсивная терапия шоковых состояний. – Чита: ИИЦ ЧГМА, 2006. - 24 с.
17. Степанов. А.В., Шильников В.А., Хворов Д.А. Анестезиологическая помощь у беременных // Актуальные вопросы интенсивной терапии. – 2007. - №20. – С.63-64.
18. Степанов А.В., Любин А.В., Малежик М.С. Организация медицинской помощи при катастрофах. – Чита: ИИЦ ЧГМА, 2012. - 140 с.
19. Степанов А.В., Цепелев С.Л., Цепелев В.Л., Цыбиков Н.Н., Бямбаа А.Б. Результаты исследования эффективности синтетического иммуностимулятора нового поколения // Фундаментальные исследования. - 2012. - №12 (1). -С. 142-145.
20. Степанов А.В., Краденов А.В. Лейкоцитарный фибринолиз в тромболитической терапии // Забайкальский медицинский вестник. - 2015. - № 1. - С. 125-128.
21. Степанов А.В. Механизмы коррегирующего действия полипептидов из лимфоидной ткани при иммунодефицитных состояниях и воспалении: Автореф. дис. докт. мед. наук. – Иркутск, 1995.– 40 с.
22. Степанов А.В., Лазарева И.Ю., Любин А.В., Перепелицын Н.И., Тарасова О.А. Токсикология и медицинская защита. - Чита: ИИЦ ЧГМА, 2009. - 134 с.
23. Трусова Ю.С., Михайличенко М.И., Шаповалов К.Г., Степанов А.В. Анестезиологическое обеспечение при хирургическом лечении больных с местной холодовой травмой конечностей // Актуальные вопросы интенсивной терапии. – 2007. - №2. – С.25-27.
24. Шаповалов К.Г., Михайличенко М.И., Степанов. А.В. Нарушение функции эндотелия при холодовой травме // Актуальные вопросы интенсивной терапии. – 2007. - №22. – С.53-57.
25. Шаповалов К.Г., Бурдинский Е.Н., Степанов. А.В. Оптимизация компонентов регуляции сосудистого тонуса и состояния микроциркуляторного гемостаза на фоне продленной регионарной блокады при местной холодовой травме // Анестезиология и реаниматология. – 2008. - №3. – С.20-21.
