АНАЛИЗ ВСТРЕЧАЕМОСТИ ПОЛИМОРФИЗМА Т786-С У ЛИЦ ПОЖИЛОГО ВОЗРАСТА

Артериальная гипертензия (АГ) – это мультифакторное заболевание, проявляющееся многообразной клиникой, прогрессирование которого ведет к поражению многих органов-мишеней. По данным ВОЗ АГ – одно из самых распространенных сердечно-сосудистых заболеваний (ССЗ), ведущее к инвалидизации или смерти больного.

Одним из ведущих механизмов развития АГ является чрезмерная вазоконстрикция периферических сосудов. Благодаря исследованиям в данной области было обнаружено, что оксида азота (NO) является мощным вазодилататором и его недостаток может приводить к развитию АГ [2, 4-7, 12].

Эндотелиальная синтаза оксида азота (eNOS) – один из трех ферментов, который синтезирует NO. Другие его изоформы – это индуцибельная (iNOS или NOS2) и нейрональная (eNOS или NOS3) NOS [8, 9]. eNOS траскрибируется в стенках сосудов и обеспечивает базальный уровень оксида азота в крови [13].

Множество работ выявило, что дефицит NO в крови приводит к ряду ССЗ [2, 4-7, 12]. Функциональные варианты гена eNOS влияют на уровень продукции NO, а значит, могут являться одними из факторов риска развития АГ. Одним из наиболее полно изученных полиморфизмов гена eNOS является полиморфизм Т-786С (rs2070774) в 5'-нетранслируемой области гена. Данный полиморфизм имеет три варианта генотипа: ТТ, СС, ТС. Целый ряд исследований продемонстрировал, что данный генотип является неблагоприятным в плане развития патологической вазоконстрикции периферических сосудов [1] и формировании распространенных ССЗ, таких как ишемическая болезнь сердца, АГ и коронароспазм [3, 10, 11, 14 - 16].

В ранних работах мы определяли взаимосвязь типа реакции сосудов на нагрузку с полиморфизмом Т-786С у молодых мужчин (средний возраст составил 19,3±0,8 лет) и выявили, что генотип СС статистически значимо (р<0.05) чаще встречается у лиц с гипертонической реакцией на нагрузку. Для лиц с данным генотипом был характерен более высокий тонус периферических сосудов, и дисбаланс в продукции основных вазоактивных эндотелиальных факторов (NO и эндотелина-1), а именно у лиц с гипертонической реакцией уровень NO был снижен, а уровень эндотелина-1 повышен. Кроме того, было отмечено следующее соотношение нормальных гомозигот (ТТ), гетерозигот (ТС) и патологических гомозигот (СС) – 35%, 54% и 11% соответственно. Исходя из полученных данных, нами был сделан вывод о возможной роли генотипа СС как предрасполагающего фактора к развитию АГ [1].

Для проверки данной гипотезы было проведено молекулярно-генетическое исследование 56 пожилых мужчин (средний возраст составил 71,9±11,3 лет) с АГ 1, 2 стадии и без АГ. Критерии исключения были следующие: возраст менее 60 лет, женский пол, наличие острой патологии любой этиологии. ДНК выделяли из клеток крови при помощи набора «ДНК-экспресс кровь» («Литех»). Детекцию полиморфизма Т-786С в гене NOS3 определялись методом ПЦР на базе генетической лаборатории ЦНИЛ СГМУ с использованием реактивов фирмы «Литех» (Москва).

У лиц пожилого возраста нами выявлено схожее с группой молодых лиц распределение генотипов по изучаемому полиморфизму: ТТ – 37,4%, ТС –43%, СС – 19,6%. При этом, отметим возрастание доли патологических гомозигот СС у пожилых лиц в целом с АГ и без АГ, а также тенденцию к преобладанию генотипа СС в группе с АГ (Табл.1). Однако статистический анализ возможной ассоциации полиморфизма Т- 786С с возникновением АГ (расчет отношения шансов с использованием программы с открытым доступом SNPStats) показал отсутствие какой-либо статистически значимой связи для генетических моделей (доминантной, рецессивной и аддитивой). Данный факт связан, очевидно, с малым объемом выборки группы мужчин без АГ.

Таким образом, на сегодняшний день мы не можем сделать окончательный вывод о прогностической роли полиморфизма Т-786С как фактора риска развития АГ. Необходимо увеличить объем выборки пожилых мужчин с АГ для полноценного статистического сравнения с группой без АГ.

Кроме того, представляется важным расширить число изучаемых полиморфизмов гена eNOS для выяснения их совместного влияния на формирование АГ. Полученные результаты дополнят информационную базу и позволят помочь в разработке медико-профилактических мероприятий, направленных на снижение частоты ССЗ.

Исследование выполнено при финансовой поддержке Российского фонда фундаментальных исследований и правительства Архангельской области в рамках регионального конкурса «Север» (научный проект №14-04- 98823 «Ассоциации полиморфизмов в генах NOS3, EDN1, EDNRA, EDNRB с периферической вазоконстрикцией»).

Таблица 1  

Распределение генотипов и аллелей полиморфизма Т-786С у мужчин пожилого возраста.

Список литературы

1.     Бебякова Н.А., Хромова А.В., Феликсова О.М. Взаимосвязь периферической вазоконстрикции с полиморфизмом Т-786С гена эндотелиальной синтазы оксида азота // Фундаментальные исследования. – 2013.- №12, ч.2. –С. 176-179.

2.     Власова С.П., Ильченко М.Ю., Казакова Е.Б. и др. Дисфункция эндотелия и артериальная гипертензия // Самара: ООО «Офорт». - 2010. – 192 с.

3.     Дегаева Т.А., Радайкина О.Г., Усанова А.А., Гончарова Л.Н., Антипова В.Н., Фазлова И.Х., Гуранова Н.Н. Полиморфизм гена эндотелиальной синтазы оксида азота-3 у больных артериальной гипертонией и сахарным диабетом II типа, проживающих на территории республики Мордовия // Вестник Мордовского университета. - 2013. № 1-2. С. 53-56.

4.     Денисов Е.Н., Маслова Н.В. Вазорегулирующая функция эндотелия при гипертонической болезни и хронической сердечной недостаточности // Кардиология.– 2005. - №6. – C. 28–31.

5.     Лямина Н.П., Сенчихин В.Н., Покидышев Д.А., Манухина Е.Б. Нарушение продукции оксида азота у мужчин молодого возраста с артериальной гипертензией и немедикаментозный метод ее коррекции // Кардиология. – 2001. - № 9 — C. 17-21.

6.     Малая Л.Т., Корж А.Н., Балковая Л.Б. Эндотелиальная дисфункция при патологии сердечно-сосудистой системы // Л.Т. Малая - Харьков: Торсинг.– 2000. - 432 с.

7.     Метельская В.А., Оганов Р.Г., Евсиков Е.М., Теплова Н.В. Cвязь между уровнем оксида азота в сыворотке периферической крови и характером патологии сердечно-сосудистой системы и внутренних органов у больных первичной артериальной гипертензией // Российский кардилогический журнал.– 2011. - №4. – C.23 - 31.

8.     Реутов В.П. Медико-биологические аспекты циклов оксид азота и супероксидного анион-радикала // Вестн. АМН Украины. – 2000. – № 3. – С. 35–41.

9.     Andrew P.J., Mayer B. Enzymatic function of nitric oxide synthases Andrew P.J., Mayer B.//Cardiovasc. Res. – 1999. – 43. – P. 521–531.

10. Casas J.P., Cavalleri G.L., Bautista L.E. et al. Endothelial nitric oxide synthase gene polymorphisms and cardiovascular disease: a HuGE review // Amer. J.Hum. Gen. Epidemiol. – 2006. – 17. – P. 1–15.

11. Casas, J.P.; Bautista, L.E.; Humphries, S.E.; Hingorani, A.D. Endothelial nitric oxide synthase genotype and ischemic heart disease: Meta-analysis of 26 studies involving 23028 subjects // Circulation. - 2004. - №109. – P. 1359–1365.

12. Kugiyama, K., Yasue, H., Okumura, K., Ogawa, H., Fujimoto, K., Nakao, K., Yoshimura, M., Motoyama, T., Inobe, Y., Kawano, H. Nitric oxide activity is deficient in spasm arteries of patients with coronary spastic angina // Circulation. – 1996. -№ 94. – Р.266–271.

13. Pechkovsky D.V., Zissel G. et al. Pattern of NOS2 and NOS3 mRNA expression in human A549 cells and primary cultured AEC II // Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. – 2002. – №282(4). – P.684-92.

14. Santos J.E., Desai M., Flockhart D.A. Effects of ethnicity on the distribution of clinically relevant endothelial nitric oxide variants // Pharmacogenetics. – 2001. – №11. – P. 719–725.

15. Vargas H., Segura A., Claure B. et al. Endothelial nitric oxide synthase gene polymorphism in the Indian and Mestizo populations of Mexico // Hum. Biol. – 2003. – №75. – P. 91–96.

16. Wolff B., Braun C., Schluter C. et al. Endothelial nitric oxide synthase Glu (298)/Asp polymorphism, carotid atherosclerosis and intima media thickness in a general population sample // Clin. Sci. (Lond). – 2005. – №109. – P. 475–481.