С целью уменьшения времени эксперимента, сокращения количества опытов и объективного установления оптимальных условий хроматографического разделения, теоретически был обоснован выбор достоверных и унифицированных систем растворителей для каждой исследуемой лекарственной формы с использованием критерия W.

Для установления доверительных границ определения величин Rf по каждому компоненту смеси считали, что они подчиняются закону нормального распределения. Чтобы проверить соответствие значений Rf с нормальным теоретическим распределением использовался критерий W.

Предварительно были выбраны 15 систем растворителей (Таблица 6), из которых 9 систем растворителей оказались оптимальными для идентификации папаверина гидрохлорида и дибазола в присутствии других компонентов лекарственных форм (Таблица 1).

 Таблица 1 

Исследуемые системы растворителей

№№	Растворители	Соотношение растворителей
I	Хлороформ – этанол (пары аммиака*)	4:1
II	Хлороформ – ацетон – раствор аммиака*	10:20:1,5
III	Эфир – метанол – раствор аммиака*	12:1:0,5
IV	Этилацетат – бензол – метанол	1:1:1
V	Хлороформ – ацетон	3:7
VI	Эфир – этилацетат – раствор аммиака*	4:1:0,5
VII	Бензол – ацетон	1:1
VIII	Этилацетат – эфир	1:4
IX	Хлороформ – эфир – этилацетат	1:2:3

*-концентрированный раствор

При проведении выбора условий разделения для всех компонентов, проверку согласия опытного распределения с теоретическим, осуществляли для каждого препарата. Ниже приведены поиски оптимальных систем растворителей на примере бендазола гидрохлорида для лекарственной формы состава:

Папаверина гидрохлорида Бендазола гидрохлорида

Фенобарбитала                                по 0,02

Метамизола-натрия                        0,25

Значения величин Rf бендазола гидрохлорида располагали в порядке их возрастания, получая упорядоченную выборку X 1≤ X 2….≤ X n, где объем выборки n=9, а системы растворителей располагали по мере уменьшения величины Rf (Таблица 2).

Критическая область проверки критериев W для уровня значимости 0,01 по готовым табличным данным критериев составляет W* =0,764, таким образом, значения W > W* (или 1,885 > 0,764) означает, что гипотеза справедлива.

Далее проводили определение доверительных границ для величин Rf в избранных нами системах растворителей (Таблица 3)

Таким  образом,  результаты  наблюдений  не  представляют  доказательства  о  несоответствие проверяемой гипотезы. В пределах доверительных границ находятся значения величин Rf бендазола гидрохлорида для всех систем растворителей кроме IX (Таблица 4) .

Аналогично рассчитывали пределы доверительных границ значения величин Rf для папаверина гидрохлорида (αн = 0,21, αв = 0,65), фенобарбитала (αн = 0,27, αв = 0,67). Для метамизола-натрия величина Rf в изучаемых системах растворителей близка к нулю, поэтому проводить оценку достоверности унифицированных систем нецелесообразно.

Таблица 4 

Значения величин Rf бендазола гидрохлорида, полученные опытным путем

Бендазола гидрохлорид	I	II	III	IV	V	VI	VII	VII	IX
	Величины Rf 10-2
	0,78	0,70	0,70	0,65	0,62	0,48	0,48	0,47	0,40

 

При сравнении экспериментальных данных (Таблица 4) с теоретическими результатами нормального распределения определено, что системы растворителей №№ I – III являются оптимальными, поскольку значения показателей для них в наибольшей степени достоверны.

Унифицированной следует считать систему растворителей III: эфир – метанол – аммиака растворконцентрированный  (12:1:0,5),  с  помощью  которой  проводится  идентификация  в  7  изучаемых лекарственных формах аптечного и заводского изготовления (Таблица 5).

В качестве основных элюирующих компонентов были выбраны хлороформ, эфир диэтиловый, этилацетат и бензол, обладающие средней элюирующей активностью. К элюентам добавляли полярные органические растворители: этанол 95%, метиловый и н-бутиловый спирты, ацетон и др. Поскольку в состав изучаемых смесей лекарственных веществ входят соли органических азотистых оснований и их соли, то в системы растворителей как основную добавку вводили концентрированный раствор аммиака. Образующиеся основания гидрофобны и подвижность их относительно тонкого слоя сорбента увеличивается (Таблица 6).

Таблица 6 

Результаты разделения изучаемых соединений методом ТСХ

Системы растворит елей	Препараты
	Папаве рина гидрох лорид		Бендазо- ла гидрохл орид	Метами- зол натрий	Фено- бар- битал	Амино- филлин	Кофе- ин- бензоат натрия		Глюко- за		Сахар	Теобро -мин
Значения величин Rf · 10-2        (n= 15)*
I	88	78		2	17	17	81	4		5		53
II	65	70		0	27	4	50	0		0		21**
III	47	70		0	24	4	34	0		0		14
IV	56	65		2	72	48	а)42 б) 66	22		12		39
V	11**	62		0	63	27	а)29 б) 67	0		0		18
VI	24	48		0	22	0	11	0		0		2

VII	12**	48	0	70	18	а)25 б) 70	0	0	10**
VIII	4	47	0	72	9	а) 5 б) 73	0	0	7
IX	9	40	0	62	8**	а) 9 б) 61	0	0	0
X	31	40**	6	71	44	а)42 б) 68	5	2	16
XI	33*	34**	0	64	30	а)34 б) 55	4	3	16
XII	32	27	19	28	20	а)24 б) 43	0	0	5
XIII	17**	14	7	50	37	54	0	2	12
XIV	12**	13	7	13	11	а)25 б) 70	0	0	33
XV	4	4	0	20	0	а) 9 б) 20	0	0	3

 

Примечание:       * -  доверительный интервал не превышает ± 3 · 10-2 ** - в указанных системах площадь пятен анализируемых веществ S ≥ 20 мм2 Кофеин-бензоат натрия – а) кофеин; б) бензоат натрия.

Заключение. Проведенные предварительные экспериментальные и теоретические исследования позволили разработать методики идентификации лекарственных форм, содержащих бендазола гидрохлорид и папаверина гидрохлорид в присутствии других ингредиентов. При идентификации проводили сравнения величин Rf ингредиентов лекарственных форм с табличными (Таблица 6) и с данными полученными для изучаемых веществ в тех же условиях (свидетели).

Список литературы

 

1.   Рощина Л.Л. Выявление условий хроматографического поведения папаверина гидрохлорида и бендазола гидрохлорида в присутствии ряда лекарственных веществ методом тонкослойной хроматографии (ТСХ) (статья) Материалы Международной научно-практической конференции "Диалог наук в XXI веке".-Уфа: РИО ИЦИПТ, 2014.- С. 41-47

2.       Сумина Е.Г., Штыков С.Н., Сорокина О.Н., Петракова А.В., Угланова В.З. Тонкослойная хроматография флавоноидов на силикагеле в модифицированных мицеллярных подвижных фазах на основе додецилсульфата натрия.- «Сорбционные и хроматографические процессы», 2014.- Т.14, Вып.1.- С. 52-64.

3.          Reich E., Widmer V. Thin Layer Chromatography // Ullmann's Encyclopedia of Industrial Chemistry. — Wiley, 2012. — DOI:10.1002/14356007.b05_301.pub2

© Рощина Л.Л, Миронова О.А., 2017