Актуальность. Бронхиальная астма (БА) является одним из наиболее распространенных хронических заболеваний у детей, при этом многими исследователя подчеркивается повсеместная гиподиагностика заболевания. В настоящее время практическое значение имеет поиск и усовершенствование доступных неинвазивных скрининговых методов диагностики [1,2].
Цель работы
Выявить особенности иммунологических показателей индуцированной мокроты (ИМ) и слюны у детей с легкой интермиттирующей БА и возможность использования этих методов для диагностического скрининга.
Материалы и методы. В исследование включено 120 детей в возрасте от 6 до 18 лет, проживающих в г. Челябинске; из них - 75 детей с легкой интермиттирующей БА. На момент обследования дети находились в периоде ремиссии, не имели эпизодов респираторной инфекции в течение 1 месяца и не получали базисную терапию в течение последних 6 месяцев. Диагноз БА устанавливался в соответствии с критериями «Национальной программы» [2]. Группу контроля составили 45 детей без аллергических заболеваний.
Индукция мокроты проводилась по разработанной нами методике с использованием гипертонического раствора хлорида натрия 42 детям с БА и 13 детям группы контроля [3]. Слюну собирали натощак, без стимуляции. Исследование проведено 33 детям с БА и 32 детям группы контроля.
В ИМ и слюне определяли уровень IgE, sIgA, субклассов иммуноглобулинов IgG (1-4), IL-4, IL-8, TNFα; все результаты были пересчитаны на единицу белка. Обработка данных проводилась на базе пакетов прикладных программ Statistica for Windows 6.0 и SPSS 12.0, с использованием непараметрических методов, отображение результатов в квартилях (Q25-Q75). Для всех видов анализов статистически достоверными считались значения р<0,05.
Результаты и обсуждения
Иммунологические показатели ИМ обследованных детей представлены в Табл.1.

                                                                                                                           Таблица 1

Иммунологические показатели ИМ у обследованных детей

Показатели	Группа БА	Группа контроля
	Me	Me
	25-75%	25-75%
TNF-a, пг/мг белка	2,26	1,71
	1,00-4,70	0,36-2,23
IL-4, пг/мг белка	0,96*	0,49
	0,49-1,45	0,37-0,94
IL-8, пг/мг белка	102,4*	41,5
	45,3-158,9	20,6-64,9
IgE, МЕ/мг белка	0,83*	0,24
	0,38-1,31	0,10-0,50
IgG1, мкг/мг белка	2,77	1,93
	1,58-3,46	1,51-2,80
IgG2, мкг/мг белка	0,7	0,47
	0,35-1,26	0,32-0,67
IgG3, мкг/мг белка	0,42*	0,14
	0,23-0,62	0,01-0,35
IgG4, мкг/мг белка	0,11*	0,01
	0,03-0,25	0,002-0,14
sIgA, мкг/мг белка	95,7*	81,2
	80,5-160,9	54,8-94,4

Примечание. * – значимость различий (р<0,05) с группой контроля.

В нашем исследовании содержание TNF-α – основного провоспалительного цитокина – при БА превышало значения группы контроля в 1,3 раза, а уровень IL-4, который является основным цитокином, вовлечённым в патогенез аллергического ответа, важнейшим и обязательным фактором индукции IgE, а также может стимулировать продукцию TNF-α, - был выше при БА почти в 2 раза.
Интерлейкин-8 (IL-8) – цитокин, поддерживающий позднюю фазу аллергического воспаления; отвечает за мобилизацию, активацию, дегрануляцию нейтрофилов, ангиогенез, подавляет синтез IgE. В нашем исследовании уровень IL-8 в группе с БА был в 2,5 раза выше по сравнению с контрольной группой (р<0,05).
Уровень иммуноглобулина Е (IgE), основная функция которого – связывание с тучными клетками и индукция их дегрануляции – в группе детей с БА был в 3,5 раза выше, чем в группе контроля (р=0,001).
Антитела класса иммуноглобулинов G (IgG) играют главенствующую роль в гуморальном иммунитете. В настоящее время выделяют четыре субкласса IgG. Клиническая значимость разных субклассов IgG состоит в их различной способности присоединяться к макрофагальным и нейтрофильным рецепторам и активировать комплемент. Известно, что субклассы IgG1 u IgG3 вырабатываются в основном в ответ на белковые антигены. Антигены полисахаридной природы вызывают синтез IgG2. Субкласс IgG4, подобно IgE, обладает цитотропными свойствами, с одной стороны, а с другой – может блокировать связывание общего IgE, снижая его мембраноатакующее действие.
Содержание субклассов IgG1 и IgG2 между группами достоверно не отличалось, а субклассов IgG3 и IgG4 было выше при БА соответственно в 3 и 11 раз, чем в группе контроля (р<0,05). Считается, что повышение уровня IgG4 сопровождается чрезмерной дегрануляцией тучных клеток, избыточной секрецией биологически активных веществ и обструкцией дыхательных путей.
Дефицит секреторного иммуноглобулина A (sIgА) усиливает проницаемость слизистой оболочки и способствует проникновению аллергена. Особенно этот механизм важен в случае ингаляционных причин развития приступа астмы. В то же время недостаточность sIgА приводит к активации инфекции в дыхательных путях. В нашем исследовании не обнаружено снижения содержания sIgА в мокроте при БА, что, возможно, связано с легким интермиттирующим течением заболевания.
Иммунологические показатели слюны обследованных детей представлены в Табл.2.

                                                                                                                           Таблица 2

Иммунологические показатели слюны у обследованных детей

Показатели	Группа БА	Группа контроля
	Me	Me
	25-75%	25-75%
TNF-a, пг/мг белка	8,2	7,09
	(4,17-18,46)	(2,99-19,54)
IL-4, пг/мг белка	5,63	6,01
	(3,45-12,07)	(2,43-9,71)
IL-8, пг/мг белка	263,5*	38,8
	(126,3-579,6)	(43,2-374,7)
IgE, МЕ/мг белка	1,25*	0,007
	(0,002-5,97)	(0,002-5,16)
IgG1, мкг/мг белка	0,75	0,3
	(0,32-2,47)	(0,15-0,7)
IgG2, мкг/мг белка	0,42	0,2
	(0,21-1,73)	(0,05-0,6)
IgG3, мкг/мг белка	0,17	0,08
	(0,06-0,35)	(0,02-0,21)
IgG4, мкг/мг белка	0,04*	0,01
	(0,01-0,13)	(0,0-0,05)
sIgA, мкг/мг белка	101,8	104,8
	(71,48-140,5)	(61,1-136,6)

Примечание. * – значимость различий (р<0,05) с группой контроля.

В нашем исследовании содержание в слюне IL-8 при БА превышало значения группы контроля в 6,8 раза (аналогичные результаты получены при исследовании ИМ), а уровень IgE был в десятки раз выше по сравнению с контрольной группой (р<0,05). Также как и в ИМ, в слюне было высоким содержание субкласса IgG4 в группе с БА (р<0,05); не обнаружено снижения содержания sIgА при БА. Сравниваемые группы не отличались ни по уровню IL-4, TNF-α ни по содержанию субклассов IgG1-3 в слюне.
Таким образом, выявленные изменения иммунологических показателей индуцированной мокроты и слюны, характеризуются по большинству параметров однонаправленными сдвигами и могут быть использованы в качестве неинвазивных скрининговых методов исследования у детей для выявления бронхиальной астмы.

Список литературы

1. Глобальная стратегия лечения и профилактики бронхиальной астмы (пересмотр 2011 г.)/под ред. А.С. Белевского. – М.: Российское респираторное общество, 2012. – 108 с., ил.
2. Национальная программа «Бронхиальная астма у детей. Стратегия лечения и профилактика». – 4-е изд., перераб. и доп. – Москва: Оригинал-макет, 2012. – 184с.
3. Пат. 2364341 РФ Способ получения индуцированной мокроты у детей для оценки степени и характера воспаления слизистой бронхов / В.И. Куличков, Ю.Л. Мизерницкий, О.Г. Рыбакова, Е.Е. Минина, Я.И. Жаков. – №2008116364; заявл. 24.04.2008; опубл. 20.08.2009, Бюл. № 23. – 10 с.