11 марта 2016г.
В медицинской диагностике активно распространяются методы люминесцентной спектроскопии, которые основаны на использовании специальных молекул-фотосенсибилизаторов, помещаемых в исследуемую ткань. При регистрации люминесценции этих молекул можно получить информацию об их окружении. Главными проблемами при этом являются необходимость учета многих факторов, влияющих на люминесцентные свойства сенсибилизатора. Для более эффективного решения диагностических задач требуется обширные знания о внутритканевой локализации красителя и изменении его люминесцентных свойств при различных условиях в ткани.
Нами проведен сравнительный анализ спектров люминесценции ксантенового красителя эритрозина в тканях внутренних органов здоровых и больных (со спонтанными и перевитыми злокачественными опухолями молочных желез) мышей линии BYRB. Выбор эритрозина обусловлен его спектрально-люминесцентными свойствами, низкой токсичностью и хорошей растворимостью в воде.
Образцы тканей извлекались в ходе операции, окрашивались путем погружения в водный раствор эритрозина концентрации 10-3 М на 3 минуты. Регистрация спектров осуществлялась ФЭУ-100, через монохроматор МДР-41. Возбуждение люминесценции производилось ксеноновой лампой высокого давления через монохроматор МДР-206. Управление экспериментальной установкой производилось автоматически через систему КАМАК.
Обнаружено, что в тканях с патологией интенсивность люминесценции эритрозина в 2 – 3 раза выше, чем в тканях здоровых животных. Это согласуется с известными данными аналогичных исследований с другими молекулами-зондами [1-5] и косвенно свидетельствует о более интенсивном накоплении красителя в больных тканях.
Максимум флуоресценции эритрозина в тканях животных с патологией смещается в длинноволновую область спектра по сравнению со спектрами свечения красителя в воде (см. Рисунок 1).
Сдвиг максимума флуоресценции эритрозина свидетельствует о его связывании с внутритканевыми компонентами, прежде всего с белками. Обращает на себя внимание максимальный сдвиг максимума в наиболе дедифференцированных перевитых опухолях. Из этих данных следует, что подвижность молекул красителя в ткани ограничена. В тканях больных животных влияние окружения на флуоресценцию эритрозина заметно больше, чем в нормальных. Полученные результаты могут быть востребованы при разработке методов оптической диагностики и фотодинамической терапии.
Список литературы
1. N. Johnsson and K. Johnsson Chemical Tools for Biomolecular Imaging // Chem.Biology, VOL.2 NO.1, 31–38, 2007.
2. S.N. Letuta, A.F. Kuvandykova, S.N. Pashkevich and A.M. Saletskii./Features of the Delayed Fluorescence Kinetics of Exogenous Fluorophores in Biological Tissues//Russian Journal of Physical Chemistry A, 2013, Vol. 87, No. 9, pp. 1582–1587.
3. T. Veuthey, G. Herrera, V.I. Dodero Dyes and Stains: from molecular structure to histological application / Frontiers in Bioscience, 01/2014; Vol. 19. P. 91–112.
4. С.Н. Летута, В.С. Маряхина, С.Н. Пашкевич, Р.Р. Рахматуллин Кинетика длительной люминесценции молекулярных зондов в клетках биологических тканей // Вестник ОГУ, 2011, №1 (120), 182–186.
5. В.В. Тучин Оптическая биомедицинская диагностика. В 2 т. Т. 1 / Перевод под ред. В.В. Тучина. - М.: ФИЗМАТЛИТ, 2006. - 560 с.
