13 декабря 2015г.
Спектрофотометрический метод отличается простотой методик анализа, экспрессностью, доступностью и является наиболее распространенным. Использование спектрофотометрического метода для анализа субстанций затруднено из-за отсутствия государственных стандартных образцов на данный препарат. Выпуск таких стандартных образцов является дорогостоящим, так как они находят применение только в фармацевтическом анализе. Поэтому способ определения с использованием государственных стандартных образцов будет малодоступным для многих лабораторий. В связи с этим актуальной задачей является разработка методик спектрофотометрического определения с использованием оптических образцов сравнения [1].
В качестве оптического образца сравнения была исследована пиридинкарбоновая-3 кислота. Были изучены ее спектральные характеристики в области от 220 до 330 нм в воде (рН = 4,5), растворе хлористоводородной кислоты 0,1 М (рН = 1,1), растворе натрия гидроксида 0,1 М (рН = 12,5) (рис. 1). Спектр поглощения пиридинкарбоновой-3 кислоты при рН 13,0 характеризуется одной полосой с максимумом поглощения при 264±3 нм и минимумом поглощения при 232±3 нм.
При уменьшении кислотности среды (рН 1,1) наблюдается смещение максимума поглощения в более коротковолновую область спектра (до 261±2 нм) с одновременным увеличением интенсивности полосы поглощения.
Рис.1.УФ-спектр 0,001% раствора пиридинкарбоновой-3 кислоты
Для исследуемого химического соединения рассчитаны оптимальные области поглощения (Таб. 1), в которых оно может быть использовано в качестве оптического образца сравнения в спектрофотометрическом анализе лекарственных средств, на основании разработанной ранее методологии выбора оптических образцов сравнения [1].
В качестве оптического образца сравнения могут применяться вещества, для которых интервал между аналитической длиной волны и максимумом (или минимумом поглощения) этого образца сравнения не превышает половины полуширины его полосы поглощения.
Таб.1. Оптические характеристики пиридинкарбоновой-3 кислоты при различных значениях рН.
Таблица 1
Приведенные в таблице оптимальные области поглощения образца сравнения пиридинкарбоновой-3 кислоты, установленные расчетным способом, были подтверждены экспериментально. Для этого изучали зависимость погрешности измерения величины оптической плотности растворов пиридинкарбоновой-3 кислоты при различных длинах волн в области, соответствующей половине полуширины его полос поглощения. В интервале длин волн 256-272 нм ошибка измерения величины оптической плотности составляет 0,3-1,3% и укладывается в допустимую для спектрофотометрического анализа лекарственных средств погрешность (2%).
Изучение стабильности растворов пиридинкарбоновой-3 кислоты (Рис.2) показало, что наиболее устойчивы растворы никотиновой кислоты с рН 13,0. Поэтому в качестве оптимального растворителя для спектрофотометрического определения никотиновой кислоты нами выбран 0,1М раствор натрия гидроксида (рН 13,0).
Рис. 2. Зависимость оптической плотности пиридинкарбоновой-3 кислоты от времени хранения
Нами изучено применение пиридинкарбоновой-3 кислоты в качестве оптического образца сравнения для спектрофотометрического определения ацикловира. Ранее [2] были изучены спектры поглощения растворов ацикловира в интервале рН 1,1 – 13,0. Была определена аналитическая длина волны ацикловира – 261 нм. Изучение стабильности растворов ацикловира показало, что наиболее устойчив раствор ацикловира с рН 13,0. Поэтому в качестве оптимального растворителя для спектрофотометрического определения ацикловира нами был выбран 0,1М раствор натрия гидроксида (рН 13). Аналитическая длина волны ацикловира входит в интервал оптимальный для пиридинкарбоновой-3 кислоты (256-272 нм), поэтому пиридинкарбоновая-3 кислота может быть предложена в качестве оптического образца сравнения для спектрофотометрического определения ацикловира [3].
Следует отметить, что у пиридинкарбоновой-3 кислоты и ацикловира совпадают максимумы поглощения, что видно из Рис.2. Следовательно, можно предположить, что погрешность анализа ацикловира при отмеченных выше оптимальных условиях не будет превышать допустимую.
Рис. 2. Спектры ацикловира и пиридинкарбоновой-3 кислоты (никотиновой кислоты) в 0,1М растворе NaOH
В связи с тем, что удельные показатели поглощения ацикловира и никотиновой кислоты не совпадают, необходимо рассчитать коэффициент пересчета [2]. Коэффициент пересчета ацикловира по никотиновой кислоте равен 0,4878. Результаты количественного определения ацикловира в субстанции представлены в таблице 2. Анализ приведенных результатов показывает, что при спектрофотометрическом определении ацикловира по оптическому образцу сравнения никотиновой кислоте и по РСО ацикловира получены сопоставимые результаты. Относительная погрешность определения не превышает 0,48%. Методика спектрофотометрического определения с использованием оптического образца сравнения характеризуется хорошей воспроизводимостью (Sr не превышает 0,044).
Таблица 2
Таб.2.Результаты спектрофотометрического определения ацикловирапо оптическому образцу сравнения никотиновой кислоте и по РСО ацикловира
Проведена сравнительная оценка разработанной методики с методикой нормативного документа, которая показала преимущества методики спектрофотометрического определения по оптическому образцу сравнения: доступность, экспрессность, высокая воспроизводимость, отсутствие высокотоксичных реактивов.
Список литературы
1. Илларионова Е.А., Сыроватский И.П., Плетенёва Т.В. // Модифицированный метод сравнения в спектрофотометрическом анализе лекарственных средств // Вестник РУДН. Сер. медицина. - 2003.- № 5 (24). - С. 66- 70.
2. Илларионова Е.А., Сыроватский И.П., Федотов С.В. Новый вариант спектрофотометрического определения ацикловира // Сибирский медицинский журнал (Иркутск). - 2011. - №3. - С. 44-46.
3. Илларионова Е.А., Сыроватский И.П., Иноземцев П.О. Спектрофотометрическое определение бендазола // Сибирский медицинский журнал (Иркутск). – 2009. – №8. – С. 42-44.
