30 ноября 2015г.
Ген ß2-адренорецептора имеет три клинически значимых полиморфизма с доказанной ассоциацией с различными фенотипами бронхиальной астмы. Известна ассоциация полиморфизма Argl6Gly с ночной астмой, влияние его на ответ лечения ингаляционными бета-адреномиметиками. Предполагается, что аллель Gly 16 может быть неравномерно распределен среди больных БА с разной степенью тяжести течения заболевания. Наиболее распространенными являются полиморфизм 46-го нуклеотида (кодон 16 аминокислоты, Argl6Gly) и 79- го (27-ой кодон, Gln27Glu) . Показано, что больные БА, гомозиготные по аллелю Glyl6 (Glyl6/Glyl6), отличаются более низкими значениями показателей ФВД по сравнению с гетерозиготными больными БА (Argl6/Glyl6) [1,2,3]. Таким образом, полиморфизм аминокислотной последовательности β2- адренорецептора оказывает существенное влияние на течение бронхиальной астмы, степень бронхиальной гиперреактивности и лабильность бронхов. Результаты ассоциативных исследований противоречивы: в ряде исследований установлена значимость полиморфных локусов Arg16Gly, Gln27Glu в патогенезе БА, в формировании ответа пациентов на терапию β2- агонистами, в других продемонстрировано, что полиморфные варианты гена ADRB2 не ассоциированы с БА [3, 4, 5]. Вариабельность фармакологического ответа на β2-адреномиметики и противоречивые литературные данные, полученные при оценке эффективности терапии, показателей функции внешнего дыхания у больных БА с различными генотипами изучаемых полиморфных вариантов гена ADRB2 [1,3, 4].
Цель: Проанализировать аллельно-частотную распространенность полиморфизма Argl6Gly гена ADRB2 у условно здоровых детей, и детей страдающих бронхиальной астмой различной степени тяжести.
Материалы и методы: обследована популяция детей, проживающих на территории Астраханской области. Дети были распределены по двум группам. Контрольная группа была представлена условно здоровыми детьми в
количестве 91 человек и детей с бронхиальной астмой в количестве 86 человек. Диагноз бронхиальной астмы и ее тяжесть выставлен в соответствии с критериями международных документов, национальной программы по лечению и стратегии бронхиальной астмы у детей. Группы больных разделялись по тяжести течения заболевания. Дети с легкой персистирующей астмой - 18 человек (20,9 %), со среднетяжелой – 42(48,8 %) и тяжелой- 26 (30,3%).
Для выполнения молекулярно-генетического анализа производили выделение тотальной ДНК из цельной крови с помощью стандартного метода фенол-хлороформной экстракции. Генотипирование полиморфных маркеров изучаемых генов осуществляли с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР) и анализа полиморфизма длины рестрикционных фрагментов (ПДРФ-анализа). Для проверки соответствия распределения генотипов ожидаемому при равновесии Харди–Вайнберга (РХВ), сравнения частот аллелей и генотипов, оценки связи аллелей генов использовали критерий χ2 Пирсона с поправкой Йетса на непрерывность.
Результаты: было выявлено преобладание генотипов ag и gg над гомозиготным аа в популяции здоровых и больных детей с астмой с высокой степенью достоверности (р=0,00001). Рассматривая ассоциированность каждого генотипа с риском формирования астмы, нами не установлено достоверных величин: аа (р=0,5), gg(р=0,3), ag(р=0,27). При анализе аллельных ассоциаций со степенью тяжести астмы выявлено достоверное преобладание генотипов ag/ gg р=0,00001.
Распределение частот генотипов в здоровой популяции и больных астмой Таблица 1
|
Группы детей
|
|
генотипы
|
|
|
|
аа
|
gg
|
ag
|
|
Астма (n=86)
|
13
|
39
|
34
|
|
Здоровые дети (n=90)
|
17
|
30
|
43
|
|
|
χ2= 0,4 р=0,5
|
χ2=0,7 р=0,3
|
χ2=1,2 р=0,27
|
Распределение частот генотипов в зависимости от тяжести астмы Таблица 2
|
|
|
Степень тяжести астмы
|
|
|
генотипы
|
Легкая
|
Средней тяжести
|
тяжелая
|
|
аа
|
1
|
8
|
5
|
|
ag/gg
|
17
|
34
|
21
|
|
|
χ2=28 р=0,00001
|
χ2=32 р=0,00001
|
χ2=18,р=0,0001
|
Таким образом, для детей с бронхиальной астмой, проживающих в Астраханском регионе характерны аллельные ассоциации ag/gg по полиморфизму Argl6Gly гена ADRB2.
Список литературы
1. Васьковский Н.В. Роль полиморфизма гена р 2-адренергического рецептора в развитии бронхиальной астмы /Н.В. Васьковский , Л.М Огородова , М. Б Фрейдин // Медицинская генетика. — 2006. — № 1. — С. 10-14.
2. Бакирова А.Н. Гиперреактивность бронхов и ее связь с полиморфизмом гена бета-2-адренорецепторов у больных бронхиальной астмой кыргызской национальности/ А.Н. Бакирова, М.М. Миррахимов, А.А. Алдашев. Пак О. А.//Пульмонология.-2006.- № 1.- С. 76-80.
3. Брянцева О.Н.Полиморфизм гена бета-2-адренергического рецептора и эффективность бронхолитической терапии у детей с бронхиальной астмой /О.Н.Брянцева, Е.Е.Тихомиров, Н.В.Журкова//Педиатрическая фармакология.- № 3, том 4.- 2007.
4. Саркисян Л.К. Полиморфизм гена бета-2-адренорецептора и тяжесть течения бронхиальной астмы//Вестник Российского Университета Дружбы Народов.-№1.- С. 141-142.
5. Green S. A., Turki J., Innis M. and Liggett S. B. Amino-terminal polymorphisms of the human p2-adrenergic receptor impart distinct agonist-promoted regulatory properties // Biochemistry. — 1994. — V. 33. — P 9414- 9419.
