ВЛИЯНИЕ ПЕПТИДА LYS-GLU НА АКТИВНОСТЬ МАКРОФАГОВ

Известно, что макрофаги являются основной преградой на пути вторжения бактериальных патогенов. От их функциональной активности зависит форма иммунного реагирования организма на патоген, развитие и исход патологического процесса. При формировании специфического иммунного ответа макрофаги выполняют функцию презентации антигена. Макрофаги также принимают участие в эффекторной фазе гуморального иммунного ответа, захватывая и уничтожая патогенные бактерии, опсонизированные специфическими антителами и комплементом [2, 8, 15]. Также они принимают участие в гемостазе [9, 31]. Однако первоочередной

функцией макрофага является фагоцитоз [2, 7, 10].

Доказано, что макрофаги принимают участие в реализации синдрома системного воспалительного ответа при перитоните [3, 16, 32], термических ожогах кожи [4, 5, 6] при отморожениях [25, 26], пневмониях [14, 18], миокардитах [13], пакреатите [1], различных гнойных ранах [30] и другой патологии [11, 12, 17, 20] и при особых состояниях [22, 23]. При этом макрофаги являются основным продуцентом провоспалительных цитокинов [27, 33]. В литературе имеются сведения о регуляции фагоцитарной и синтетической активности макрофагов иммуноактивными пептидами [19, 21, 28, 29]. Показано, что иммуномодуляторы нового поколения, применемые в клинике, оказывают действие на макрофагальное звено [24, 32].

Цель. Провести исследование активности пептида Lys-Glu (синтетический гормон тимуса) в отношении макрофагов.

Материалы и методы. Макрофаги у  мышей получали путем перитонеального лаважа. Клетки культивировали 6 часов в среде RPMI-1640 во флаконах Лейдена при 37°C, в атмосфере 5% СО2 и влажности 80- 90%. В культуральную среду добавляли 10% фетальную сыворотку теленка, 50 мкМ 2-меркаптоэтанола, 2 мМ глутамина, 10 мМ Hepes-буфера и 50 мкг/мл гентамицина. Фагоцитарную активность макрофагов определяли по поглощению частиц латекса, добавленных к монослою клеток из расчета 100 частиц на фагоцит. Кислородзависимые процессы изучали в тесте восстановления нитросинего тетразолия, кислороднезависимые - по содержанию лизосомальных катионных белков  [16]. Статистическую обработку проводили с помощью программы STATISTICA 10 для Windows.

Полученные результаты. Нами установлено, что под влиянием пептида Lys-Glu фагоцитарный индекс увеличивается на 50,9% (p<0,01) и на 34,6% (p<0,05) возрастает фагоцитарное число. В следующей серии экспериментов нами изучено действие пептида на интенсивность кислородзависимых процессов в макрофагах, которую оценивали в тесте восстановления нитросинего тетразолия. Показано, что под влиянием пептида Lys-Glu происходит повышение кислородзависимого метаболизма перитонеальных макрофагов. Так, под действием последнего количество НСТ-положительных клеток возрастает на 65,3%. Кислороднезависимый метаболизм и содержание лизосомальных катионных белков макрофагов определяли по цитохимическому ЛКТ-тесту. Установлено, что содержание лизосомальных катионных белков после инкубации макрофагов  с пептидом достоверно не изменяется (Табл.1).

Таблица 1  

Влияние пептида Lys-Glu на активность макрофагов (М±SD)

* p<0,05 – значимостm различий показателей опытной и контрольных групп

Таким образом, синтетический аналог регуляторных пептидов тимуса обладают способностью стимулировать фагоцитарную активность и кислородзависимый метаболизм перитонеальных макрофагов. Этим механизмом во многом объясняется положительное действие пептидов из центральных органов иммунитета при различной патологии [10, 24, 27].

Список литературы

1.     Лобанов С.Л., Степанов А.В., Лобанов Л.С. Современные подходы к лечению острого панкреатита. – Чита: Деловое Забайкалье, 2008. - 160 с.

2.     Маянский А.Н., Маянский Д.Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге .- Новосибирск : Наука, 1983.- 254 с.

3.     Лиханов И.Д., Цепелев С.Л., Цепелев В.Л. Результаты применения иммуномодуляторов нового поколения в лечении больных с перитонитом // Дальневосточный медицинский журнал. - 2007. - № 3. - С. 71-74.

4.     Подойницына М.Г., Цепелев В.Л., Степанов А.В. Изменение микроциркуляции при дермальных ожогах // Фундаментальные исследования. - 2015. - № 1-9. - С. 1893-1896.

5.     Подойницына М.Г., Цепелев В.Л., Степанов А.В. Клиническая эффективность магнитоплазменной терапии ожогов кожи // Забайкальский медицинский вестник. - 2015. - № 2. - С. 99-102.

6.     Подойницына М.Г., Цепелев В.Л., Степанов А.В. Применение физических методов лечения ожогов кожи // Современные проблемы науки и образования. – 2015. – № 5 – С. 184.

7.     Сафронов Д.В., Цепелев В.Л. Антибиотикопрофилактика и антибиотикотерапия хирургической инфекции: учебное пособие. - Чита: ИИЦ ЧГМА, 2006. – 39 с.

8.     Сафронов Д.В., Цепелев В.Л. Хирургический сепсис: учебное пособие. - Чита: ИИЦ ЧГМА, 2006. – 49 с.

9.     Степанов А.В., Краденов А.В. Лейкоцитарный фибринолиз в тромболитической терапии // Забайкальский медицинский вестник. - 2015. - № 1. - С. 125-128.

10. Степанов А.В. Механизмы коррегирующего действия полипептидов из лимфоидной ткани при иммунодефицитных состояниях и воспалении : Автореф. дис. докт. мед. наук. – Иркутск, 1995.– 40 с.

11. Степанов А.В., Лазарева И.Ю., Любин А.В., Перепелицын Н.И., Тарасова О.А. Токсикология и медицинская защита. - Чита : ИИЦ ЧГМА, 2009. - 134 с.

12. Степанов А.В., Тарасова О.А., Любин А.В., Перепелицын Н.И. Средства защиты при массовом поражении населения. – Чита : ИИЦ ЧГМА, 2010. - 85 с.

13. Степанов А.В. Острые нарушения функции кровообращения. – Чита : ИИЦ ЧГМА, 2008. - 36 с.

14. Степанов А.В. Острые нарушения функций дыхания. Чита : ИИЦ ЧГМА, 2008. - 66 с.

15. Степанов А.В. Интенсивная терапия шоковых состояний. – Чита : ИИЦ ЧГМА, 2006. - 24 с.

16. Степанов А.В., Цепелев В.Л., Цепелев С.Л., Аюшиев О.Д. Пептидные регуляторы гуморального иммунитета. - Чита : Поиск, 2002. - 160 с.

17. Степанов А.В., Любин А.В., Малежик М.С. Организация медицинской помощи при катастрофах. – Чита : ИИЦ ЧГМА, 2012. - 140 с.

18. Степанов А.В. Острая дыхательная недостаточность. – Чита : ИИЦ ЧГМА, 2008. - 48 с.

19. Степанов А.В., Цепелев В.Л. Влияние синтетических пептидов сумки Фабрициуса на функциональную активность макрофагов // Забайкальский медицинский вестник. - 2014. - № 2. - С. 44-47.

20. Степанов А.В., Любин А.В., Перепелицын Н.И., Тарасова О.А., Малежик М.С. Медицинская защита при радиационных и токсических поражениях. - Чита : ИИЦ ЧГМА, 2011. - 343 с.

21. Степанов А.В. Пептидные регуляторы из сумки Фабрициуса // Забайкальский медицинский вестник. - 2004. - № 4. - С. 97-101.

22. Степанов А.В. Особенности анестезии у пациентов пожилого и старческого возраста // Забайкальский медицинский вестник. - 1996. - № 1. - С. 41-43.

23. Степанов А.В. Интенсивная терапия при черепно-мозговой травме // Забайкальский медицинский вестник. - 2002. - № 2. - С. 22-27.

24. Степанов А.В., Цепелев В.Л., Мельникова С.Л. Иммуностимулятор из центрального органа гуморального иммунитета - сумки Фабрициуса // Сибирский медицинский журнал (Иркутск). - 2013. - Т. 117. № 2. - С. 32-34.

25. Шаповалов К.Г., Михайличенко М.И., Степанов. А.В. Нарушение функции эндотелия при холодовой травме // Актуальные вопросы интенсивной терапии. – 2007. - №22. – С.53-57.

26. Шаповалов К.Г., Бурдинский Е.Н., Степанов. А.В. Оптимизация компонентов регуляции сосудистого тонуса и состояния микроциркуляторного гемостаза на фоне продленной регионарной блокады при местной холодовой травме // Анестезиология и реаниматология. – 2008. - №3. – С.20-21.

27. Цепелев В.Л. Механизмы действия регуляторных пептидов при иммунодефицитных состояниях и воспалении: Автореф. дис. …доктора мед. наук. - Чита, 2003. – 40 с.

28. Цепелев В.Л., Цепелев С.Л. Иммуностимулирующая активность синтетических бурсопептидов // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2003. - Т. 136. № 7. - с. 80-83.

29. Цепелев В.Л., Цепелев С.Л. Результаты доклинического исследования эффективности иммуностимулятора нового поколения - бурсопептида-2 // Сибирский научный медицинский журнал. - 2003. - т. 23. № 1. - с. 80-83.

30. Цепелев В.Л., Крюкова В.В. Принципы и методы лечения гнойных ран: учебное пособие. - Чита: ИИЦ ЧГМА, 2006. – 38 с.

31. Цепелев В.Л., Курупанов С.И., Крюкова В.В., Саклаков В.С. Профилактика и лечение послеоперационных тромбоэмболических осложнений: учебное пособие. - Чита: ИИЦ ЧГМА, 2005. – 44 с.

32. Цепелев  В.Л.  Использование  вилона  в  комплексном  лечении  больных  с  тяжелым  перитонитом //Актуальные вопросы интенсивной терапии. - 2015. -№ 32. - с. 8-11.

33. Цепелев В.Л., Степанов А.В. Влияние регуляторных пептидов на продукцию провоспалительных цитокинов // Забайкальский медицинский вестник. - 2015. - № 2. - С. 147-150.