Новости
09.05.2023
с Днём Победы!
07.03.2023
Поздравляем с Международным женским днем!
23.02.2023
Поздравляем с Днем защитника Отечества!
Оплата онлайн
При оплате онлайн будет
удержана комиссия 3,5-5,5%








Способ оплаты:

С банковской карты (3,5%)
Сбербанк онлайн (3,5%)
Со счета в Яндекс.Деньгах (5,5%)
Наличными через терминал (3,5%)

ИЗМЕНЕНИЯ ФОСФАТАЗНОЙ АКТИВНОСТИ КОРЫ НАДПОЧЕЧНИКОВ ПОД ВЛИЯНИЕМ СТИМУЛЯТОРА РОСТА РАСТЕНИЙ

Авторы:
Город:
Чебоксары
ВУЗ:
Дата:
05 апреля 2016г.

Целью настоящего исследования явилось изучение гистохимических показателей  кислой  и щелочной фосфатаз коры надпочечников экспериментальных животных на фоне длительного перорального введения стимулятора роста растений (альфа-(2-хлорэтокси) поли [2 хлорэтилфосфорилоксиэтиленоксил]-омега-(2 хлорэтокси-2-хлорэтилфосфо нада) в различных дозах. Стимулятор роста растений синтезирован в Чувашском государственном университете имени И.Н. Ульянова в 1990 г. профессором В.В. Кормачевым и его учениками с присвоением государственного регистрационного номера 9998590 от 18.10.90 г. Авторское свидетельство №1792610, опубликовано в Бюллетене изобретений в 1993 г. №5.

В качестве экспериментальных животных были использованы самцы морских свинок массой 400-600г. Основные опыты поводились в 4 сериях (одна - интактная, три серии - с введением раствора стимулятора роста растений) из расчета 2,0 мг/ кг, 20,0 мг/кг, 100,0 мг/кг массы тела животного.

Все животные были забиты до кормления под глубоким масочным эфирным наркозом. Надпочечник замораживался в камере микротома (МК-25) при температуре -21°С с последующим изготовлением срезов толщиной 15 мкм, которые подвергались дальнейшим гистохимическим методам исследования [2].

Результаты проведенных исследований приведены в Табл.1.

  

Таблица 1  

Активность кислой и щелочной фосфатаз в структурах надпочечников (в усл. ед.)


Структуры

Серии опытов

Контроль

(1-ая) серия, М±m

2-ая серия,

М±m

3-я серия,

М±m

4-ая серия,

М±m

Кислая

фосфатаза

Клубочковый

0,60±0,01

0,56±0,01

0,48±0,01

0,41±0,01

Пучковый

0,34±0,01

0,30±0,01

0,25±0,01

0,19±0,01

Сетчатый

0,27±0,01

0,24±0,01

0,21±0,01

0,16±0,01

Щелочная

фосфатаза

Клубочковый

0,21±0,01

0,18±0,01

0,14±0,01

0,12±0,01

Пучковый

0,23±0,01

0,19±0,01

0,17±0,01

0,13±0,01

Сетчатый

0,16±0,01

0,14±0,01

0,12±0,01

0,08±0,01

 

Уровень активности щелочной фосфатазы определяется с использованием фосфат нафтола AS-BI, прочного синего ВВ и трис-HCI-буфера в прописи Burstone (1962). Последующее определение активности фермента проводилась вычислением логарифма оптической плотности по методике (З. Лойда с соавт., 1982). Активность кислой фосфатазы определялась с использованием фосфат нафтола AS-BI, прочного синего ВВ и 0,1М ацетатного буфера в прописи Burston (1962).

Фосфатазами называют ферменты, которые катализируют отщепление фосфорной кислоты от ее органических соединений. В зависимости от оптимума рН различают несколько групп фосфомоноэстераз. Наиболее клинико-диагностическое значение имеет определение фосфомоноэстеразы 1 или щелочной фосфатазы, оптимум рН 8,6 – 10,1, а также фосфомоноэстеразы 2 или кислой фосфатазы, оптимум рН 5,0 – 5,5 [2]. Щелочная фосфатаза относится к большой группе белков – эктоферментов, которые «заякорены» на внешней поверхности мембран клеток с помощью гликозилфосфатидилинозитола. Связанный с мембраной фермент является тетрамером, а растворимый, циркулирующий в крови димером. Фосфолипазы С и Д плазмы способны отщеплять фермент от мембраны, переводя его в растворимую форму. В крови присутствуют и высокомолекулярные фрагменты мембран клеток печени вместе с прикрепленной к ним ЩФ [1], [2], [3], [4], [5].

Кислая фосфатаза локализуется преимущественно в лизосомах, в эндоплазматическом ретикулуме и, возможно, в гиалоплазме. Активность кислой фосфатазы особенно высока в селезенке, почках, печени, тонком кишечнике и надпочечниках [2], [4].

При гистохимическом исследовании активности кислой фосфатазы в клубочковом слое коры надпочечников выявлено, что уровень этого фермента в 4-ой серии составила 0,41±0,01 усл. ед., 3-ей серии 0,48±0,01 усл. ед., 2-ой серии 0,56±0,01 усл. ед., 1-ой серии 0,60±0,01 усл. ед.. В пучковом слое коры надпочечников активность этого фермента в 4-ой серии составила 0,19±0,01 усл. ед., 3-ей серии 0,25±0,01 усл. ед., 2-ой серии 0,30±0,01 усл. ед., 1-ой серии 0,34±0,01 усл. ед.. В сетчатом слое коры надпочечников уровень содержания кислой фосфатазы составил в 4-ой серии 0,16±0,01 усл. ед., 3-ей серии 0,21±0,01 усл. ед., 2-ой серии 0,24±0,01 усл. ед., 1-ой серии 0,27±0,01 усл. ед..

Гистохимическое исследование активности щелочной фосфатазы в клубочковом слое коры надпочечников составило в 4-ой серии 0,12±0,01 усл.ед., 3-ей серии 0,14±0,01 усл.ед., 2-ой серии 0,18±0,01 усл. ед., 1-ой серии 0,21±0,01 усл. ед.. В пучковом слое коры надпочечников уровень содержания щелочной фосфатазы составил в 4- ой серии 0,13±0,01 усл. ед., 3-ей серии 0,17±0,01 усл. ед., 2-ой серии 0,19±0,01 усл. ед., 1-ой серии 0,23±0,01 усл. ед.. В сетчатом слое коры надпочечников активность этого фермента составила в 4-ой серии 0,08±0,01 усл. ед., 3- ей серии 0,12±0,01 усл. ед., 2-ой серии 0,14±0,01 усл. ед., 1-ой серии 0,16±0,01 усл. ед..

Гистохимическое исследование активности ферментов кислой и щелочной фосфатаз выявило, что активность этих ферментов снижается по мере увеличения дозы вводимого стимулятора роста растений.

 

Список литературы

1.      Иванов Л.Н., Колотилова М.Л., Ялукова С.Л., Юсов А. А., Алексеева Н. В. Общая и клиническая патофизиология печени и желчевыводящих путей. Учебное пособие. Чув. ГУ, Чебоксары, 2012. 111с.

2.      Лойда З. Гистохимия ферментов. Лабораторные методы. / З. Лойда, Р. Госсрау, Т. Шиблер/ -М., 1982 – 270с.

3.      Тимин О.А., Клементьева Т.К., Серебров В.Ю., Жаворонок Т.В., Кузьменко Д.И., Удинцев С.Н. Биохимические методы исследования в клинико-диагностических лабораториях: практическое пособие. – Томск: STT, 2002. – 244 с.

4.      Юсов А.А., Кириллов Н.А., Яковлева Л.М., Селиванова С.В. Неспецифическая реактивность организма экспериментальных животных в условиях перорального воздействия стимулятора роста растений.. // Материалы Межрегиональной научно-практической конференции, посвященной 40-летию кафедры патофизиологии. «Актуальные вопросы клинической и экспериментальной  медицины» Чебоксары, 26 сентября 2014 г. С.117-123.

5.      The metastasispromoting phosphatase PRL-3 shows activity toward phosphoinsitides. McParland Victoria, Varsano Giulia, Li Xun, Thornton Janet, Baby Jancy, Aravindt Ajay, Meyer Christoph, Pavic Karolina, Rios Pablo, Kohn Maja. Biochemistry [КЭ]. 2011. 50, №35. С.7579-7590..