04 апреля 2016г.
Введение.
Специальных исследовании посвященных морфологии ткани аденогипофиза после гетеротопической аллотрансплантации гипофиза на сосудистых связях в эксперименте нет. Имеются ряд исследовании посвященных анатомическому обоснованию пересадки гипофиза человека на артерио-венозной ножке [1], а также морфологические работы по изучению состояния гематотестикулярного баръера после аллотрансплантации клеток аденогипофиза в дистопированный семенник [2, 5]. Гомотрансплантация гипофиза в эксперименте [3]. Изменения клеток аденогипофиза при совместной имплантации с различными ядрами гипоталамуса в эксперименте приведены в следующей работе [4]. Таким образом: тканевые структуры аденогипофиза на модели гетеротопической аллотрансплантации гипофиза на сосудистых связах не исследованы.
Цель работы.
Изучение морфологии кровеносных сосудов и тканевых структур аденогипофиза после его аллотрансплантации на сосудистой ножке у экспериментальных животных (собак) без специальных воздействии на систему иммуногенеза реципиента.
Материал и методы исследования.
Всего в опыте использовано 30 взрослых собак-самцов (15 доноров и 15 реципиентов). Подключение трансплантатов производилось в гетеротопической позиции на одну из ветвей системы бедренной артерии собаки, которая соединилась с внутренней сонной артерией транплантата. Отток венозной крови обеспечивался за счет анастомоза одной из ветвей большой подкожной вены реципиента с пещеристым синусом трансплантата (предпатент № 13616 РК). На 1-3, 10-15, 21-30 суток животные забивались и трансплантаты подвергались гистологическому и гистохимическому исследованию. Срезы толщиной 5-7 мкм окрашивались гемотоксилин- эозином, по Нисслю, шифф-йодной кислотой, по Ван-Гизону, по Хейлу, по В.В. Куприянову, азаном по Ганденгайну.
Полученные результаты.
Исследования показали, что 1-3 сутки после эксперимента наблюдается нарушение органного кровотока и повреждение сосудистого русла трансплантата. Первую очередь, это проявляется в капиллярной сети. Они извилисты, расширены и переполнены кровью, местами нарушена целостность стенок, встречаются бессосудистые зоны. На некоторых препаратах выражен резкий экстра и интрацеллюлярный отек, а также отмечены очаги эритродиапедеза. Капилляры первичной капиллярной сети увеличены в диаметре до 13-17 мкм (контроле 7-9 мкм). С увеличением диаметров капилляров, отмечается увеличение поперечных размеров каппилярных петель. Капилляры промежуточной и инфундибулярной частей гипофиза напоминают форму «кисточки». В это же время сложно отличить прекапилляр от посткапилляра. При этом диаметры приносящих капилляров увеличиваются до 18-20 мкм. Диаметры длинных и коротких портальных вен также увеличиваются, они становятся извилистыми. По ходу портальных вен встречаются ампулообразные расширения. Синусоиды резко расширены, их диаметры достигают 45-55 мкм. Кроме расширенных синусоидов встречаются очень суженные синусоиды, диаметром менее 10 мкм. Емкость кровеносного русла через 1 сутки в 2,0 раза, через 3 сутки 10 раз выше контрольной. В эти же сроки после операции наблюдаются выраженные изменения в тканевой структуре гипофиза, выражающиеся в отеке соединительнотканной оболочки, коллагеновые волокна которой местами утолщены и разволокнены. Железистые клетки гипофиза расположены беспорядочно среди элементов отечной стромы. Некоторые участки аденогипофиза утрачивают свои тинкториальные свойства. Границы клеток нечеткие. Больше всех хромофобных клеток (93%). Площадь клеток и их ядер уменьшены. Количество базофильных клеток почти 8 раз ниже, чем в контроле. Клетки реже полигональной, чаще округлой формы. У многих клеток отмечается выхождение зернистости за пределы клеточных оболочек, их ядра смещены к периферии. Ацидофильные клетки отличаются от базофильных большим размером и более интенсивно- окрашенным ядром. Эти клетки значительно меньше, чем в контроле (контроль 53%, через 3 дня 93%). Клеточные оболочки ацидофильных клеток плохо различимы, ядра клеток смещены к периферии. Вес гипофиза в эти сроки относительный (8,0±0,2 мкм) и абсолютный 7,7±0,1 мг и 70,0±0,05 мг. В 10-14-ые сутки стенки синусоидных капилляров были отечны, коллагеновые и базальные мембраны разволокнены. Явления гиперемии, проявляющиеся резким расширением синусоидов передней доли гипофиза и пограничных зонах, а в последней отмечено появление тучных клеток, а также незначительной полиморфноклеточной инфильтрации. Отмечается дальнейшее увеличение диаметров капилляров как первичной, так и вторичной капиллярных сетей аденогипофиза, что приводит к увеличению емкости сосудистого русла до 0,40 мм3 вместо 0,20 мм3 контроль. Проявляется резкое расширение синусоидов главной передней части аденогипофиза и переполнения их эритроцитами. Более значительные морфологические изменения отмечались также в периферической и пограничной зонах трансплантата, в последней также отмечено появление тучных клеток, а также незначительной полиморфноклеточной инфильтрации. В эти сроки процессы деструкций клеточных элементов усиливаются. Так количество базофильных клеток уменьшается до 6%. Почти все базофилы теряют гранулы. Эти клетки сохраняют еще свою форму и размеры, но в связи с дегрануляцией, протоплазма клеток приобретает светлый, ячейстый вид. Ацидофильные клетки являются более устойчивыми. Они также, как базофилы дегранилируют. Одновременно с потерей гранул уменьшаются их размеры, следует отметить что ацидофильные клетки долгое время не теряют специфику своего типа. Количество ацидофилов уменьшается с 36% в контроле до 18-20% в эксперименте. На ряде препаратов из цитоплазмы малодифференцированных ацидофилов наблюдается выход секрета, которые распологаясь между остальными типами клеток аденогипофиза, раздвигает их, что затрудняет их идентификации. Хромофобные клетки переживают хромофильные. Количество хромофобных клеток составляет почти 70% (контроль 52%) от общего количества клеток аденогипофиза. На ряде препаратов отмечается некроз железистых долек. К концу третей и четвертой недели операции незначительная лимфоидная инфильтрация распространяется по интерстициальной ткани аденогипофиза, особенно в периваскулярных пространствах. На фоне слабо выраженной инфильтрации лимфоидными элементами в интерстициальной ткани гипофиза происходят деструктивные изменения. Сосудистая ножка трансплантата проходима. Ткань гипофиза пронизана многочисленными кровеносными сосудами различного калибра, а также прослойками соединительной ткани. Среди капилляров можно выделить узкие и широкие капилляры. Хорошо видны сохранивщиеся клетки аденогипофиза, это – хромофобы.
Заключение.
Исследования показали, что 1-3 сутки после эксперимента наблюдается нарушение органного кровотока и повреждение сосудистого русла трансплантата. Первую очередь, это проявляется в капиллярной сети. Они извилисты, расширены и переполнены кровью, местами нарушена целостность стенок, встречаются бессосудистые зоны. В эти же сроки после операции наблюдаются выраженные изменения в тканевой структуре гипофиза, выражающиеся в отеке соединительнотканной оболочки. Железистые клетки гипофиза расположены беспорядочно среди элементов отечной стромы. Некоторые участки аденогипофиза утрачивают свои тинкториальные свойства. Границы клеток нечеткие.
10-14 сутки стенки синусоидных капилляров были отечными, коллагеновые и базальные мембраны разволокнены. Явления гиперемии, проявляющиеся резким расширением синусоидов передней доли гипофиза и пограничных зонах, а в последней отмечено появление тучных клеток, а также незначительной полиморфноклеточной инфильтрации. Так количество базфильных клеток уменьшается до 6%. Почти все базофилы теряют гранулы. Ацидофильные клетки являются более устойчивыми. Они также, как базофилы дегранилируют. Даже в сроки 30 суток после пересадки видны клетки аденогипофиза и проходимые внутриорганные сосуды. Ткань гипофиза пронизана мелкими кровеносными сосудами и прослойками соединительной ткани. В более поздние сроки начинают преобладать склеротические процессы.
Список литературы
1. Головко М.И. Анатомическое обоснование пересадки гипофиз человека на артерио-венозных ножке. Украинский съезд анатомов, гистологов, эмбриологов и топографо-анатомов. Винница,1980. С.80.
2. Дендеберов Е.С. Состояние гематотестикулярного барьера после аллотрансплантации клеток аденогипофиза в дистопированный семенник.//Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 2001, том 131, №2. С.232-236.
3. Никитина В.В. Гомотрансплантация гипофиза в эксперименте. // Научные труды. Том 54. Рязань,1976.С.72-78.
4. Стадников А.А. Изменения клеток аденогипофиза при совместной имплантации с различными ядрами гипоталамуса. // Архив анатомии, гистологии и эмбриологии, 1980. №10. С.63-70.
5. Титаров Д.Л., Юшков П.В. Клеточный состав аллогенного аденогипофиза пересаженного в семенник крысы. //Новые оперативные технологии (анатомические, экспериментальные и клинические аспекты). Москва, 2002.С.272.
