Новости
12.04.2024
Поздравляем с Днём космонавтики!
08.03.2024
Поздравляем с Международным Женским Днем!
23.02.2024
Поздравляем с Днем Защитника Отечества!
Оплата онлайн
При оплате онлайн будет удержана комиссия 3,5-5,5%
Подпишитесь на нашу рассылку
Будьте в курсе всех наших новостей и мероприятий
|
ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПОЛИСАХАРИДОВ И ОРГАНИЧЕСКИХ КИСЛОТ В СБОРЕ, ОБЛАДАЮЩЕМ УРОЛИТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТЬЮ
Москва
27 февраля 2016г.
Введение.
Мочекаменная болезнь (МКБ) по количеству больных занимает одно из первых мест в мире по сравнению с другими урологическими заболеваниями, в России этот показатель равен 34,2 %. Согласно статистическим данным в 65-70% случаях болезнь диагностируется у лиц в возрасте 20-55 лет, т.е. в наиболее трудоспособном периоде жизни.
Не смотря на широкое внедрение новых высокоэффективных методов диагностики и лечения МКБ, частота рецидива продолжает оставаться высокой – до 38,4%. Общеизвестно, что как бы эффективно не была проведена операция по удалению камня, без последующей комплексной метафилактики конечный результат лечения будет неудовлетворительным. Одним из основных звеньев метафилактики камнеобразования и лечения на амбулаторном этапе является фитотерапия.
Растительные средства, как правило, оказывают мягкое и эффективное лекарственное воздействие, практически отсутствуют осложнения и нежелательные побочные эффекты при длительном применении. Особенно это важно при такой хронической патологии, как МКБ, когда необходимо обеспечение многомесячного и даже многолетнего диуретического, спазмолитического, противовоспалительного, антибактериального, иммуномодулирующего эффекта. Поэтому актуальной задачей является поиск и изучение эффективных средств, полученных из растительного сырья, предназначенных для профилактики и лечения хронического течения МКБ [2].
Нами разработан пятикомпонентный растительный сбор для лечения и профилактики МКБ на основе листьев брусники (Vaccinium vitis-idaea (L.), травы хвоща полевого (Equisetum arvense (L.), корней лопуха (Arctium lappa (L.), плодов укропа огородного (Anethum graveolens (L.), травы полыни обыкновенной (Artemisia vulgaris (L.).
Цель нашей работы - идентификация моносахаридного состава полисахаридов и органических кислот уролитического сбора.
Материалы и методы.
Объектом изучения являлся сбор уролитический на основе листьев брусники, травы хвоща полевого, корней лопуха, плодов укропа огородного, травы полыни обыкновенной. В качестве исследуемых растворов использовали водное извлечение данного уролитического сбора.
Идентификацию моносахаридного состава полисахаридов и органических кислот водной вытяжки из сбора проводили с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) [1].
Анализ проводили на высокоэффективном жидкостном хроматографе фирмы «Gilston» с последующей компьютерной обработкой результатов с помощью программы «Мультихром для «Windows». В качестве неподвижной фазы была использована металлическая колонка 6,5 x 300 мм ALTECH OA-1000 Organic Acids. В качестве подвижной фазы 0,005М раствор серной кислоты. Исследование проводили при комнатной температуре. Скорость подачи элюента 1 мл/мин. Продолжительность анализа 20,38 мин. Детектирование проводилось с помощью УФ-детектора при длине волны 190 нм.
Для получения исследуемого раствора около 4,0 г растительного сырья помещали в колбу вместимостью 100 мл, прибавляли по 70 мл воды, присоединяли к обратному холодильнику и нагревали на кипящей водяной бане в течение 1 ч. с момента закипания водной смеси в колбе. После охлаждения смесь фильтровали через бумажный фильтр в мерную колбу объѐмом 25 мл и доводили растворителем до метки (исследуемый раствор).
Параллельно готовили серию растворов сравнения сахаров (рамноза, ксилоза, мальтоза, сорбитол, глюкоза, арабиноза, сахароза, фруктоза, галактоза) и органических кислот в серной кислоте (аскорбиновая, лимонная, щавелевая, яблочная (маликовая), янтарная, виннокаменная кислоты).
По 50 мкл исследуемых растворов и растворов сравнения моносахаридов и органических кислот вводили в хроматограф и хроматографировали по выше приведенной методике. Идентификацию разделенных веществ проводили путем сопоставления времен удерживания пиков, полученных на хроматограмме компонентов смеси, со временами удерживания растворов сравнения.
Результаты исследования и их обсуждение
В уролитическом сборе методом ВЭЖХ было установлено 4 соединения, которые представлены моносахаридами (фруктоза, глюкоза) и органическими кислотами (щавелевая, янтарная). Результаты хроматографического анализа исследуемого водного извлечения уролитического сбора представлены на рисунке и в таблице.
Рис.1. Хроматограмма ВЭЖХ моносахаридов и органических кислот водного извлечения уролитического сбора
Таблица 1
Результаты исследования моносахаридов и органических кислот сбора уролитического методом ВЭЖХ.
№
|
Время, мин
|
Высота, mV
|
Площадь, mV*сек
|
ФО
|
Содержание,
%
|
Название
|
1
|
4,221
|
132,64
|
6138.85
|
1,000
|
16,46
|
Щавелевая к-та
|
2
|
5,294
|
58,97
|
2992.95
|
1,000
|
8,03
|
Неидентифиц.
|
3
|
6,412
|
43,76
|
1294,90
|
1,000
|
3,47
|
Фруктоза
|
4
|
6,987
|
54,40
|
1759,09
|
1,000
|
4,72
|
Глюкоза
|
5
|
8,684
|
300,03
|
21298,00
|
1,000
|
57,11
|
Янтарная к-та
|
6
|
12,15
|
13,68
|
950,58
|
1,000
|
2,55
|
Неидентифиц.
|
7
|
14,44
|
19,76
|
2857,88
|
1,000
|
7,66
|
Неидентифиц.
|
8
|
30,13
|
623,24
|
37292,25
|
0,020
|
100
|
|
Выводы.
1. Установлен качественный состав органических кислот и моносахаридов уролитического сбора методом ВЭЖХ, в результате которого были идентифицированы 2 органические кислоты (янтарная, щавелевая) и 2 моносахарида (фруктоза, глюкоза).
2. Установлено, что в фитокомпозиции преобладает из органических кислот – янтарная кислота, из моносахаридов – глюкоза.
Список литературы
1. Доржбал Э. Фармакогностическое изучение антимикробного сбора и сухого экстракта: Автореф. дис.. . канд.фарм.наук.- Москва. – 2001. - 24 с.
2. Смыслова О.А. Исследования по идентификации и определению содержания арбутина в уролитическом растительном сборе. / Смыслова О. А., Маркарян А.А. // «Современная медицина: актуальные вопросы»: Сб. ст. по материалам XLI междунар. науч.-практ. конф. – Новосибирск: Изд. «СибАК», 2015. - №3 (39). – С. 84 – 91.
|
|