АНАЛИЗ РЕЗУЛЬТАТОВ КЛИНИКО - ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ НАЛИЧИЯ У ПАЦИЕНТОВ УРЕАПЛАЗМЫ И ЕЕ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ К ДЕЙСТВИЮ АНТИБАКТЕРИАЛЬНЫХ ПРЕПАРАТОВ

Уреаплазмы - грамотрицательные коккобактерии, семейство микоплазм, считаются условно-патогенными микроорганизмами, занимает промежуточное положение между одноклеточными микроорганизмами и вирусами [3]. В 1986 году Комитет экспертов Всемирной организации здравоохранения внес U. urealyticum в классификацию возбудителей болезней, передаваемых половым путем, но в последующей Международной классификации болезней 10-го пересмотра 1998 года подтверждения не последовало [5]. Поэтому под уреаплазмозом, болезнью, вызванной уреаплазмой, в настоящее время понимают воспалительный процесс в мочеполовых органах, если при лабораторном обследовании были обнаружены U.urealyticum и не выявлены другие патогенные микроорганизмы, способные вызвать данное воспаление. Уреаплазму выявляют также у практически здоровых людей, бессимптомное носительство может быть примерно у 70% сексуально активных женщин и мужчин. Мнение специалистов, занимающихся данной проблемой, противоречиво, существует взгляд, что уреаплазма является обычным представителем нормальной микрофлоры. Заболевание начинается, когда концентрация микроорганизмов превышает определенный порог. Наибольшую опасность U.urealyticum представляет при беременности, есть данные о связи инфицирования беременной женщины с внутриутробным поражением у плода печени, почек, возникновением пороков сердца, центральной нервной системы и кожных покровов. Отмечают инфицирование ребенка при прохождении его по родовым путям: вероятность возможна до 40% у доношенных, у недоношенных младенцев с низкой массой тела -100% [4]. В современном медицинском наблюдении беременных обследование на уреаплазму является обязательным. Выделяют 14 серотипов уреаплазм, объединенных в два биовара (подвида) – Parvo и Т-960 [1]. При изучении клинического значения биоваров, определяемых с использованием метода ПЦР, установили, что при хронических воспалительных заболеваниях мочеполовых органов присутствует преимущественно биовар Parvo, а в случае бактериального вагиноза – биовар Т-960 [8]. Диагностически значимым считают титр микроорганизмов выше 104 КОЕ/мл. В таком случае рекомендовано применение антибиотиков с определением чувствительности микроорганизмов к конкретным препаратам [6]. Лечение уреаплазмоза должно проводиться исключительно врачом после установления точного диагноза.
Метод исследования. В настоящей статье обсуждаются результаты обследований, проведенных в течение 6 месяцев в 2013 -2014 гг. Обработаны диагностические заключения, которые выполнены с использованием наборов реагентов «MYCOPLASMA SYSTEM Plus» (Италия), предназначенных для культивирования и количественного определения методом сухой биохимии чувствительности к антибиотикам урогенитальных микоплазм Ureaplasma urealyticum, Micoplasma hominis, T.vaginalis. Набор представлен плашкой с 24 луночками, три из них идентифицируют количество микробных клеток в мазке (м.к./л), в трех интервалах определения: 1) от 102 до 104 2) от104 до105 , 3) более105. Микроорганизмы в лунках идентифицируют тестами на уреазную активность (U. urealyticum), на аргиназную (M. hominis). Остальные лунки заполняют содержимым с определенными антибиотиками известных титров. В лунках, где сохраняется рост микоплазм, цвет среды изменяется с желтого на красный.
Обсуждение результатов. Проведен микробиологический анализ 245 пациентов, у 119 человек (48,6 %) выявлен положительный результат. Одновременно у 17% обследованных одновременно с U. urealyticum выявлен M. hominis, не обнаружены другие возбудители T.vaginalis и Candida spp. Окончательная выборка составила 100 человек, обнаруживших положительную реакцию на U. urealyticum. На Рисунке 1 представлены результаты обработки диагностических заключений титра (CFU/ml) U. urealyticum у обследованных. Высокий титр обнаружен у 55% обследованных. Среди этих пациентов с высоким риском патологических нарушений, обусловленных значительным содержание уреаплазмы, 35% обратились в связи с обследованием по поводу планируемой беременности или контроля состояния здоровья в период беременности, 16% с воспалительными заболевания урогенитального тракта.



Рис.1. Количество результатов (%) диагностических заключений от общего числа обследованных в зависимости от величины титра. Примечание: у 12% титр < 10 4 ; у 33% титр < 10 5; у 55% титр 3 < 10 6.

Проведенные в 2009г. исследования в двух странах, Финляндии [9] и Греции [10], позволяют нам выявить различную чувствительность уреаплазмы к различным антибиотикам (Табл.1). Наибольшие отличия проявляются в отношении эффективности трех препаратов: Erythromycinе, Оfloxacinе, Сiprofloxacinе. В Табл.2 представлены результаты собственных исследований, выявляющих особенности чувствительности U. urealyticum.

                                                                                                                           Таблица 1
Результаты тестирования на чувствительность к антибиотикам [9, 10]

Наименьшее воздействие в наших исследованиях выявлено у препаратов Clarinomicine, Erythromycinе. Наименьшую резистентностьв микоплазма проявляет при дозе 4 мг/мл (в скобках указаны результаты устойчивости в %) к следующим антибиотикам: Tetracycline (2), Minоcyline (4), Clindamycine (3). При увеличении дозы антибиотика (8 мг/мл) полностью исчезает устойчивость к Tetracycline (0%), и снижается к Doxycycline (2). Антибиотики группы тетрациклина действуют на стадиях транскрипции и трансляции. Tetracycline препятствует образованию макроструктуры тРНК - рибосома, блокируя процесс трансляции. В присутствии ионов калия и магния препараты группы тетрациклина образуют комплексы с 50 S субъединицей рибосомы на участках связывания с аминоацил тРНК. У человека эти функции выполняет субъединица 70 S, считают, что доксициклин с ней не может связываться [2]. Тетрациклин в небольших концентрациях оказывает специфическое действие на биосинтез белка бактериями, но в более высоких концентрациях способен образовывать прочные хелаты с ионами металлов. Связывание иона магния вызывает подавление фосфорилирования моносахаров и киназных реакций субстратного фосфорилирования.

                                                                                                                           Таблица 2
Антибиотик и его титр, к которому оказалась устойчивой микоплазма

Тетрациклин угнетает нитратредуктазные реакции, выводя ионы марганца из сферы действия микроорганизма. Эти процессы блокируют энергообмен в клетках уреаплазмы, что окончательно прекращает биосинтез белка [7]
Заключение Подтверждение предполагаемого диагноза инфицирования уреаплазмой при обследовании составило 49%. Высокий титр уреаплазмы характерен для 55% пациентов. Наименьшая резистентность выявлена по отношению к антибиотикам Tetracycline , Minоcyline, Clindamycine , которые могут быть рекомендованы для проведения лечения. Наши данные совпадают с результатами [2], которые также свидетельствуют, что тетрациклины высокоактивны в отношении U.urealyticum и не противоречат данным зарубежных коллег, исследования которых обсуждались в нашей работе.

Список литературы

1. Акимова В.В., Погосян Г.П., Коновалова А. А., Карибаева М. И. Анализ видов уреаплазм различными методами детекции продуктов полимеразной цепной реакции // Онлайн-Журнал «Биотехнология. Теория и практика» [Электр] Режим доступа: http://www.biotechlink.org/Articles.aspx?articleID=85
2. Гомберг М.А. , Соловьев А. М. Лечение уреаплазменной инфекции урогенитального тракта [Электр] Режим доступа: http://www.eurolab.ua/encyclopedia/565/46616
3. Донецкая Э.Г.Клиническая микробиология: руководство Изд. ГЭОТАР-Медиа.- 2011. 480 с
4. Кунгуров Н.В., Евстигнеева Н.П., Кузнецова .Н., Зильберберг Н.В., Сергеев А.Г. Микоплазменные инфекции урогенитального тракта. Курган.Изд-во «Зауралье». 2010 . 132с
5. Международный список заболеваний [Электр] Режим доступа: http://www.emhc.ru/vrach- dermatovenerolog/ureaplazmoz-lechenie.html
6. Немченко О.И., Уварова Е.В. Урогенитальный микоплазмоз // Consilium Medicum -2007.- №1.-С. 45 – 51
7. Справочник химика [Электр] Режим доступа: http://chem21.info/info/1581699.
8. Шапран М.В. Чувствительность Ureaplasma urealyticum к антибиотикам // Гинекология. - 2005. - Т. 7, №1. – С. 47.
9. Turan H., Oczcimen E., Arslan H. Antimicrobial susceptibility of genital Micoplasma hominis and Ureaplasma urealyticum (Электр. ресурс). Режим доступа: URL: http//www. backwellpublishing com.//eccmid19 (25.0414).
10. .Waites, K.B., Katz B., Shelonka , R.L. Micoplasmas and ureaplasma аs neonatal pathogens //Clin. Microbiol. - 2005.-v.18.- no 4.- р.757- 789 (Электр. ресурс). Режим доступа: URL: http://cmr.asm.org./content (22.04.2014).