Актуальной задачей в области фармации является разработка новых лекарственных форм и способов стандартизации их ингредиентов. Нами предложена новая мазь «Лидозоль», содержащая 3,0 % лидокаина гидрохлорида. В качестве мазевой основы использован гель «Тизоль», который все шире начинает применяться при изготовлении мягких лекарственных форм [2, 4, 5, 7]. Для установления доброкачественности мази, путем осуществления качественного и количественного определения лидокаина гидрохлорида, предлагается высокочувствительный, достаточно простой в выполнении спектрофотометрический метод анализа [1, 3, 6].

Характер спектров поглощения зависит от pH среды растворов. Особое влияние оказывает рН среды на π→π* электронные переходы, так  как происходит  протонизация ионизированных  групп. Поэтому изучение спектральных характеристик лидокаина гидрохлорида в УФ-области проводили при различных значениях pH среды с целью получения ионизированной и молекулярной форм исследуемого вещества. Поглощение света в сильнокислой среде (pH = 1) соответствует спектру ионизированной (катиона), в щелочной среде (pH = 13) - молекулярной формы лекарственного препарата. Для создания pH среды использовали 0,1 моль/л растворы хлороводородной кислоты и гидроксида натрия. Ультрафиолетовые спектры поглощения изучали с помощью отечественного спектрофотометра СФ-2000 в пределе длин волн 190 - 280 нм. Оптическую плотность раствора лидокаина гидрохлорида измеряли в кювете с толщиной рабочего слоя 10 мм через 5 нм, а вблизи максимумов и минимумов светопоглощения - через 1 нм.

Экспериментальные данные показали, что кислый раствор лекарственного препарата максимально поглощает свет при длине волны 201-203 нм (e =27750) и минимально - при λ = 260-262 нм (Рисунок 1, кривая 1). Спектр щелочного раствора лидокаина гидрохлорида имеет максимум поглощения при длине волны 216-218 нм (e =11750) и минимум - при λ = 258-260 нм (Рисунок 1, кривая 2). Полоса светопоглощения молекулярной формы лекарственного препарата смещена батохромно на 15 нм по сравнению с максимумом спектра катионной формы, при этом наблюдается гипохромный эффект. Спектр поглощения лидокаина гидрохлорида в этаноле (Рисунок 1, кривая 3) имеет одну полосу с максимумом при λ = 203-205 нм (e =25250) и минимумом в области 260-261 нм. Растворы препарата в кислой среде и этаноле имеют максимумы поглощения в дальней УФ-области. Это создает трудности при спектрофотометрическом анализе лекарственного вещества, так как не все отечественные и зарубежные спектрофотометры пригодны для данных исследований. Молекулярная форма соединения поглощает свет при длине волны 216 нм. Однако при изготовлении и хранении щелочного раствора может выпадать основание лидокаина. Поэтому, для спектрофотометрического анализа рационально использовать минимумы светопоглощения кислого и спиртового растворов лекарственного препарата. Наличие постоянства оптических плотностей в области 260-280 нм дает предпосылки проведения исследования при данных длинах волн.

По изученным спектрам поглощения катионной и молекулярной форм анализируемого соединения рассчитаны оптические характеристики: молярные и удельные коэффициенты светопоглощения в максимальных и минимальных точках, их отношения, логарифмы молярных коэффициентов светопоглощения, отношения оптических плотностей при экстремумах и минимумах. Приведенные показатели (Табл.1) заметно отличаются друг от друга, что позволяет использовать их для идентификации лекарственного препарата в субстанции и мази «Лидозоль».

Таблица 1Оптические характеристики катионной и молекулярной форм лидокаина гидрохлорида

рН = 1			рН = 13
Константы	Цифровые значения	Константы		Цифровые значения
emax(201)	27750	emax(216)		11750
e min(260)	500	e min(260)		500
emax(201)/emin(260)	55,50	emax(216)/emin(260)		23,50

lgemax(201)	4,44	lgemax(216)	4,07
lgemin(260)	2,70	lgemin(260)	2,70
lgemax(201)/lgemin(260)	1,64	lgemax(216)/lgemin(260)	1,51
Е1%1см(201)	960,81	Е1%1см(216)	406,83
Е1%1см(260)	17,31	Е1%1см(260)	17,31

 

Гель «Тизоль» легко растворим в растворах оснований, растворим в кислотах и частично - этаноле. Поэтому нами изучены УФ-спектры поглощения кислого, щелочного раствора его и спиртовой вытяжки. Полученные данные показали, что оптическая плотность растворов геля уменьшается в области от 220 нм до 340 нм. Исходя из этого, при разработке способов количественного анализа лидокаина гидрохлорида в мази спектрофотометрическим методом его необходимо отделять от основы или растворять мазь в подходящем растворителе, а плотность спиртового раствора лекарственного препарата следует измерять по отношению к этанольной вытяжке геля «Тизоль».

Для разработки спектрофотометрического способа количественного определения лидокаина гидрохлорида в изучаемой прописи проводили математическую оценку чувствительности анализа через открываемый минимум, который устанавливали по углу наклона калибровочного графика. Для этого воспользовались теоремой о конечных превращениях Ж.Л. Лагранжа, согласно которой можно записать выражение: A(Cmax) - A(Cmin) = A(Cmax - Cmin). Принимая во внимание, что оптическая плотность раствора зависит от концентрации в пределах отрезка Cmax - Cmin , то после преобразований получим уравнение Cmin = Amin/b, где b – угловой коэффициент, который  находится  по  формуле:  Во избежание субъективного характера в определении чувствительности анализа при нахождении углового коэффициента использовали не сам график, а его аналитическое выражение. Исследование проводили при длине волны 260 нм. Открываемый минимум лидокаина гидрохлорида равен 0,015 мкг/мл при Аmin = 0,02 (Табл.2). Следовательно, спектрофотометрию в УФ-области можно использовать для количественного определения объекта исследования в мази.

Концентрацию лекарственного препарата находили способом калибровочного графика. Для его построения 0,05 г изучаемого соединения растворяли в этаноле с использованием мерной колбы емкостью 50,0 мл. К переменному объему (1,0 - 6,0 мл) прибавляли этиловый спирт до получения общего объема жидкости 10,0 мл и измеряли оптические плотности растворов с помощью спектрофотометра при длине волны 260 нм в кювете с толщиной рабочего слоя 10 мм. По полученным данным опытов строили график зависимости оптической плотности от концентрации раствора лекарственного препарата (Рисунок 2). Калибровочный график выражается прямой линией, проходящей через начало координат. Это свидетельствует о подчинении раствора лидокаина гидрохлорида основному закону светопоглощения в пределах концентраций 0,01 - 0,60 мг/мл. Прямая зависимость оптической плотности от содержания объекта исследования позволяет анализировать его спектрофотометрическим методом в мягкой лекарственной форме.

Количественное определение лидокаина гидрохлорида в субстанции проводили аналогично построению калибровочного графика. Массовую долю лекарственного препарата рассчитывали по формуле:

где: С(х) - масса лекарственного препарата, найденная по калибровочному графику, мг/мл; Vобщ - объем этанола, в котором растворена навеска анестетика (50,0 мл);

Vк, Vп - объем мерной колбы и пипетки (10,0 мл и 3,0 мл), соответственно; а(преп) - навеска лекарственного препарата, г.

Проведенные исследования и результаты статистической обработки данных спектрофотометрического анализа лидокаина гидрохлорида в субстанции (А = ± 2,20 %) позволили разработать способ количественного определения его в лекарственной форме. Методика: точную навеску мази около 0,65 г помещают в стаканчик, прибавляют 20,0 мл этанола, перемешивают до получения дисперсной системы и фильтруют смесь через складчатый фильтр (синяя лента), отбрасывая первую порцию фильтрата. Далее, 3,0 мл полученного раствора переносят в мерную колбу емкостью 10,0 мл, доводят ее объем этанолом до метки и измеряют оптическую плотность смеси при длине волны 260 нм в кювете с толщиной рабочего слоя 10 мм. Раствором сравнения используют этанольную вытяжку из геля «Тизоль», полученную аналогично исследованию лекарственного препарата в мази. Содержание лекарственного препарата в пробе (С(х), мг/мл) находят по калибровочному графику или его уравнению, а массу в мази рассчитывают по формуле:

где: а(мази) - навеска мази, взятая на анализ, г; Р - масса лекарственной формы, г;

Vобщ - объем этанола, в котором растворена навеска мази, мл; Vк , Vп - объем мерной колбы и пипетки, соответственно, мл.

Таблица 3 

Результаты спектрофотометрического анализа лидокаина гидрохлорида в мази «Лидозоль»

Способ				Допустимые нормы
Калибровочного графика		Уравнения калибровочного графика
m(преп), г	отклонение, %	m(преп), г	отклонение, %	г	отклонение, ±%
0,322	+ 7,33	0,325	+ 8,33	0,264 - 0,336	12,0
0,276	- 8,00	0,317	+ 5,67
0,317	+ 5,67	0,295	- 1,67
0,320	+ 6,67	0,315	+ 5,00
0,310	+ 3,33	0,305	+ 1,67

 

Результаты исследования (Табл.3) показали, что содержание лидокаина гидрохлорида в мази, рассчитанное способами калибровочного графика и его уравнения, соответствует допустимым отклонениям, представленным в приказе МЗ РФ от 16.10.1997 г № 305 «О нормах отклонений допустимых при изготовлении лекарственных средств и фасовке промышленной продукции в аптеках». Следовательно, спектрофотометрию как доступный, достаточно точный и простой в выполнении, современный физико-химический метод, рационально применять для качественного и количественного определения лидокаина гидрохлорида в новой лекарственной форме «Лидозоль».

 

 

Список литературы

1.     Захарова А.А., Кобелева Т.А., Сичко А.И. Спектрофотометрический анализ натрия диклофенака и лидокаина гидрохлорида в новой мягкой лекарственной форме «Диклизоль» // Казанская наука. 2010. № 3. С. 236-241.

2.     Илиев К.И., Кобелева Т.А., Сичко А.И. Актуальность исследования и применения в медицинской практике трансдермальной лекарственной формы «Дидиклозоль» // Академический журнал Западной Сибири. 2015. № 1. С. 74-75.

3.     Илиев К.И., Кобелева Т.А., Сичко А.И. Количественное определение анестезина в мази «Анестезоль» // Научный альманах. 2015. № 8. С. 949-954.

4.     Илиев К.И., Кобелева Т.А., Сичко А.И., Ларионов Л.П. Фармацевтические и фармакологические аспекты исследования новой мягкой лекарственной формы «Лидодиклозоль» // Стратегии устойчивого развития мировой науки. Евразийское Научное Объединение. 2015. № 5. С. 59-62.

5.     Илиев К.И., Сичко А.И., Кобелева Т.А. Исследование новой мягкой лекарственной формы новокаина гидрохлорида на основе геля «Тизоль» // Междун. науч. конф. «Современная фармацевтика: потенциал роста в долгосрочной перспективе». Киров, 2013. С. 80-83.

6.     Мельник К.Л., Сичко А.И., Кобелева Т.А. Исследование новой лекарственной формы «Бензтизоль» // Казанская наука. 2011. № 1. С. 395-397.

7.     Терентьева Н.Е., Илиев К.И., Кобелева Т.А., Сичко А.И. Количественное определение натрия пара- аминосалицилата в лекарственной форме с тизолем // Современные проблемы науки и образования. 2014. № 6. URL: www.science-education.ru/120-15511 (дата обращения: 27.04.2016).