Введение.
Мочекаменная болезнь (МКБ) по количеству больных занимает одно из первых мест в мире по сравнению с другими урологическими заболеваниями, в России этот показатель равен 34,2 %. Согласно статистическим данным в 65-70% случаях болезнь диагностируется у лиц в возрасте 20-55 лет, т.е. в наиболее трудоспособном периоде жизни.
Не смотря на широкое внедрение новых высокоэффективных методов диагностики и лечения МКБ, частота рецидива продолжает оставаться высокой – до 38,4%. Общеизвестно, что как бы эффективно не была проведена операция по удалению камня, без последующей комплексной метафилактики конечный результат лечения будет неудовлетворительным. Одним из основных звеньев метафилактики камнеобразования и лечения на амбулаторном этапе является фитотерапия.
Растительные средства, как правило, оказывают мягкое и эффективное лекарственное воздействие, практически отсутствуют осложнения и нежелательные побочные эффекты при длительном применении. Особенно это важно при такой хронической патологии, как МКБ, когда необходимо обеспечение многомесячного и даже многолетнего диуретического, спазмолитического, противовоспалительного, антибактериального, иммуномодулирующего эффекта. Поэтому актуальной задачей является поиск и изучение эффективных средств, полученных из растительного сырья, предназначенных для профилактики и лечения хронического течения МКБ [2].
Нами разработан пятикомпонентный растительный сбор для лечения и профилактики МКБ на основе листьев брусники (Vaccinium vitis-idaea (L.), травы хвоща полевого (Equisetum arvense (L.), корней лопуха (Arctium lappa (L.), плодов укропа огородного (Anethum graveolens (L.), травы полыни обыкновенной (Artemisia vulgaris (L.).
Цель нашей работы - идентификация моносахаридного состава полисахаридов и органических кислот уролитического сбора.
Материалы и методы.
Объектом изучения являлся сбор уролитический на основе листьев брусники, травы хвоща полевого, корней лопуха, плодов укропа огородного, травы полыни обыкновенной. В качестве исследуемых растворов использовали водное извлечение данного уролитического сбора.
Идентификацию моносахаридного состава полисахаридов и органических кислот водной вытяжки из сбора проводили с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) [1].
Анализ проводили на высокоэффективном жидкостном хроматографе фирмы «Gilston» с последующей компьютерной обработкой результатов с помощью программы «Мультихром для «Windows». В качестве неподвижной фазы была использована металлическая колонка 6,5 x 300 мм ALTECH OA-1000 Organic Acids. В качестве подвижной фазы 0,005М раствор серной кислоты. Исследование проводили при комнатной температуре. Скорость подачи элюента 1 мл/мин. Продолжительность анализа 20,38 мин. Детектирование проводилось с помощью УФ-детектора при длине волны 190 нм.
Для получения исследуемого раствора около 4,0 г растительного сырья помещали в колбу вместимостью 100 мл, прибавляли по 70 мл воды, присоединяли к обратному холодильнику и нагревали на кипящей водяной бане в течение 1 ч. с момента закипания водной смеси в колбе. После охлаждения смесь фильтровали через бумажный фильтр в мерную колбу объѐмом 25 мл и доводили растворителем до метки (исследуемый раствор).
Параллельно готовили серию растворов сравнения сахаров (рамноза, ксилоза, мальтоза, сорбитол, глюкоза, арабиноза, сахароза, фруктоза, галактоза) и органических кислот в серной кислоте (аскорбиновая, лимонная, щавелевая, яблочная (маликовая), янтарная, виннокаменная кислоты).
По 50 мкл исследуемых растворов и растворов сравнения моносахаридов и органических кислот вводили в хроматограф и хроматографировали по выше приведенной методике. Идентификацию разделенных веществ проводили путем сопоставления времен удерживания пиков, полученных на хроматограмме компонентов смеси, со временами удерживания растворов сравнения.
Результаты исследования и их обсуждение
В уролитическом сборе методом ВЭЖХ было установлено 4 соединения, которые представлены моносахаридами (фруктоза, глюкоза) и органическими кислотами (щавелевая, янтарная). Результаты хроматографического анализа исследуемого водного извлечения уролитического сбора представлены на рисунке и в таблице.
Рис.1. Хроматограмма ВЭЖХ моносахаридов и органических кислот водного извлечения уролитического сбора
Таблица 1
Результаты исследования моносахаридов и органических кислот сбора уролитического методом ВЭЖХ.
|
№ |
Время, мин |
Высота, mV |
Площадь, mV*сек |
ФО |
Содержание, % |
Название |
|
1 |
4,221 |
132,64 |
6138.85 |
1,000 |
16,46 |
Щавелевая к-та |
|
2 |
5,294 |
58,97 |
2992.95 |
1,000 |
8,03 |
Неидентифиц. |
|
3 |
6,412 |
43,76 |
1294,90 |
1,000 |
3,47 |
Фруктоза |
|
4 |
6,987 |
54,40 |
1759,09 |
1,000 |
4,72 |
Глюкоза |
|
5 |
8,684 |
300,03 |
21298,00 |
1,000 |
57,11 |
Янтарная к-та |
|
6 |
12,15 |
13,68 |
950,58 |
1,000 |
2,55 |
Неидентифиц. |
|
7 |
14,44 |
19,76 |
2857,88 |
1,000 |
7,66 |
Неидентифиц. |
|
8 |
30,13 |
623,24 |
37292,25 |
0,020 |
100 |
|
Выводы.
1. Установлен качественный состав органических кислот и моносахаридов уролитического сбора методом ВЭЖХ, в результате которого были идентифицированы 2 органические кислоты (янтарная, щавелевая) и 2 моносахарида (фруктоза, глюкоза).
2. Установлено, что в фитокомпозиции преобладает из органических кислот – янтарная кислота, из моносахаридов – глюкоза.
Список литературы
1. Доржбал Э. Фармакогностическое изучение антимикробного сбора и сухого экстракта: Автореф. дис.. . канд.фарм.наук.- Москва. – 2001. - 24 с.
2. Смыслова О.А. Исследования по идентификации и определению содержания арбутина в уролитическом растительном сборе. / Смыслова О. А., Маркарян А.А. // «Современная медицина: актуальные вопросы»: Сб. ст. по материалам XLI междунар. науч.-практ. конф. – Новосибирск: Изд. «СибАК», 2015. - №3 (39). – С. 84 – 91.