ВЛИЯНИЕ D-АСПАРАГИНА НА ПРОЛИФЕРАТИВНЫЕ ЯВЛЕНИЯ ПРИ ОТСЛОЙКЕ СЕТЧАТКИ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ У КРЫС

В настоящее время отслойка сетчатки является одной из главных причин инвалидизации населения по причине полной или частичной утраты зрения, поскольку ведет к пролиферативной витриоретинопатии — реорганизации ткани сетчатки с пролиферацией глиальных клеток. Поэтому поиск лекарственных средств, с помощью которых можно было бы контролировать пролиферативные явления в области повреждения сетчатки, является актуальной проблемой.[1]

ЦЕЛЬ РАБОТЫ. Изучение влияния D-аспарагина на формирование пролиферативной витриоретинопатии при отслойке сетчатки в эксперименте у крыс.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ. Исследование выполнено в лаборатории кафедры общей и клинической патофизиологии ГБОУ ВПО КубГМУ. Эксперименты проведены на 10 белых нелинейных самцах крыс средней массой – 178±15 гр. Содержание животных и постановка экспериментов проводилась в соответствии с международными правилами

«Guide for the Care and Use of Laboratory Animals». Все оперативные вмешательства сопровождались использованием золетил-ксилазинового наркоза.

Характеристика групп животных: группа №1 (n=2) – интактные крысы; группа №2 (n=3) – крысы, которым выполнялось моделирование отслойки сетчатки глаза; группа №3 (n=7) – крысы, которым выполнялось моделирование отслойки сетчатки глаза, с последующим спаиванием 0,1 % раствора D-аспарагина с 7 по 14 сутки от начала эксперимента.[3]

Моделирование отслойки сетчатки проводилось путем субретинального введения в левое глазное яблоко 0,02 мл препарата «Визитон».

Эвтаназия крыс из групп №1, №2 и №3 проводилась на 21 сутки эксперимента. У крыс проводился забор глаз, которые затем с целью фиксации помещали в 10% нейтральный раствор параформальдегида. Выполнялась проводка полученных образцов через    изопропанол-минеральное   масло,    с    последующей   их    заливкой   в   парафин.

Парафиновые блоки нарезали на срезы толщиной 10 мкм на микротоме МПС-2 (CCCP). Окрашивание микропрепаратов проводилось гематоксиллином и эозином. Для фотографии микропрепаратов мы использовали микроскоп Микмед-5 (Россия) и окулярную камеру Levenhuk-230 (США).

РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ.

 Случаев незапланированной гибели и осложнений у животных зарегистрировано не было. При исследовании микропрепаратов полученных от крыс из групп №1 выявлено, что сетчатка представлена десятью четко выраженными слоями, имеющими разную толщину в центральной и периферической ее области. Отмечается некоторое расслоение исследуемых микропрепаратов в области между наружным и внутренним зернистыми слоями, обусловленное несовершенством гистотехники.

На исследуемых микропрепаратах глаза у крыс группы №2 структура сетчатки значительно повреждена, послойное строение сетчатки проследить невозможно, видны остатки клеток зернистых слоев, внутренняя пограничная мембрана разрушена. В области стекловидного тела прослеживается рыхлая волокнистая структура содержащая скопление клеток (фибробласты, макрофаги, немного эритроцитов), на ее границе прослеживается волокнистая оболочка, не содержащая клеток.

При исследовании микропрепаратов глазного яблока у крыс из группы №3 выявлена значительная отслойка сетчатки от склеры в области пигментного и фотосенсорного слоев, видна значительная деструкция данных слоев, фоторецепторы не определяются. Наружный и внутренний зернистый слои имеют рыхлую, комковатую структуру, разделены набухшим наружным сплетениевидным слоем. Внутренний сплетениевидный слой разбухший, наблюдается расслоение его от внутреннего зернистого слоя. Четко прослеживается ганглионарный слой, отмечается гиперхромия, а у части его клеток набухание. Внутренняя пограничная мембрана сохранена, на всем протяжении отграничивает сетчатку от стекловидного тела. Участков разрастания клеток не обнаружено.

ВЫВОД.

Пероральное применение 0,1 % раствора D-аспарагина, с 7 по 14 сутки от развития экспериментальной отслойки сетчатки, вызванной посредством субретинального введения препарата «Визитон», значительно ограничивает пролиферативные и деструктивные изменения в области сетчатки и стекловидного тела к 21 суткам от начала эксперимента у крыс.

Список литературы

1. Глазные болезни: Учебник/Под ред. В. Г. Копаевой. —Г52 М.: Медицина, 2002. — 560с.: ил.- С.303-336

 2.     Офтальмология Учебник/Под ред. Е.И. Сидоренко. —2-е изд., испр. — М. 091 ГЭОТАР-Медиа, 2006. - 408 с. ил. – С.226-238

3.     Маляцинский И. А., Захаров В. Д., Ходжаев Н. С., Горшков И. М. Результаты хирургического лечения рецидива отслойки сетчатки в нижнем сегменте с проведением частичной ретинотомии на основе микроинвазивной эндовитреальной хирургии 25 G // ПМ. 2012. №59 С.117-119.

4. Attenuated Reactive Gliosis and Enhanced Functional Recovery Following Spinal Cord Injury in Null Mutant Mice of Platelet-Activating Factor Receptor, (Yuanyi Wang, Zhongwen Gao, Yiping Zhang)