БИОХИМИЧЕСКИЕ И ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКИЕ ПАРАЛЛЕЛИ В ОПУХОЛЯХ ЭНДОМЕТРИЯ

Проблема патогенеза предрака и рака эндометрия в течение многих лет ассоциируется с развитием «эстрогенной теории» [1, 15, 18]. Особую актуальность представляют исследования, посвященные изучению активности ферментов метаболизма эстрогенов во взаимосвязи с экспрессией белков-регуляторов клеточного цикла, апоптоза, пролиферации и ангиогененеза в малигнизированном эндометрии для понимания их роли в патогенезе рака эндометрия [2, 17, 19]. Поэтому целью настоящего исследования явилось изучение экспрессии маркеров апоптоза, неоангиогенеза и р53 во взаимосвязи с экспрессией рецепторов стероидных гормонов и активностью ферментов синтеза и метаболизма эстрогенов в опухолях эндометрия.

 В 31 опухоли эндометрия изучена экспрессия онкосупрессорного протеина р53, про- и антиапоптотических белков Bax и Bcl-2, а так же рецепторов эстрогенов и прогестерона. Проводилась оценка ангиогенеза в опухоли путем подсчета количества микрососудов, окрашенных антителами к эндотелиальным клеткам (CD31). В этих же опухолях была оценена активность ферментов метаболизма эстрогенов (ароматазы, стероид сульфатазы, суммарной эстроген 2/4-гидроксилазной активности, катехол-О-метилтрансфераза и глутатион-S- трансфераза). Средний возраст пациенток составил 58,1 ± 2,1 лет. Иммуногистохимические исследования проводили пероксидазно-антипероксидазным методом по традиционной методике. По результатам иммуногистохимического окрашивания срезов на протоонкоген Bcl-2 вся группа больных раком эндометрия была разбита на 2 подгруппы – c экспрессией Bcl-2 (Bcl-2 –позитивные опухоли, n=19) и Bcl-2-негативные опухоли (n=12). Исследование показало, что Bcl-2-позитивных и Bcl-2-негативных опухолях эндометрия примерно с одинаковой частотой выявлена умеренная и высокая экспрессия Bax. Примерно в трети опухолей, как Bcl-2-позитивных, так и Bcl-2-негативных выявлен мутантный р53. В Bcl-2- позитивных опухолях преимущественно выявлялась высокоразвитая сеть кровеносных сосудов (более чем в 73 % случаев). В то время как в Bcl-2- негативных опухолях эндометрия в основном выявлялась низкая плотность сосудов. Опухоли, экспрессировавшие Bcl-2, как правило, содержали рецепторы прогестерона в отличие от Bcl-2 негативных опухолей эндометрия. При изучении активности ферментов синтеза и метаболизма эстрогенов было выявлено, что в Bcl-2-позитивных активность стероид сульфатазы была статистически значимо выше по сравнению с Bcl-2- негативными опухолями.

 Полученные данные свидетельствуют, что неоангиогенез и апоптоз в опухолях эндометрия тесно связаны с активностью фермента синтеза эстрогенов стероид сульфатазой, а также с наличием рецепторов эстрогенов и прогестерона в опухоли. В опухолях, экспрессирующие Bcl-2, как правило, выявлялась умеренная или высокая плотность микрососудов, что по данным ряда авторов ассоциируется с худшим прогнозом для пациентов [3,6,14,18]. Кроме того, в этих опухолях интенсивность стероид сульфатаза-зависимого пути была выше, чем в Bcl-2 негативных опухолях. Эстрогены для большинства опухолей эндометрия являются митогенами, кроме того, доказан прямой генотоксический эффект эстрогенных метаболитов [4, 8,9]. Вcl-2-позитивные опухоли в основном несли рецепторы прогестерона, однако в отношении рецепторов эстрогенов картина была мозаичной и большинство опухолей не экспрессировали рецепторы эстрогенов. Отсутствие рецепторов эстрогенов в эндометриоидной аденокарциноме тела матки сопровождается нарастанием рецидивов с 12,7 % до 29 % и, в целом, связано с более неблагоприятным прогнозом [10, 12, 13]. Таким образом, в 31 опухоли эндометрия изучена экспрессия онкосупрессорного протеина р53, про- и антиапоптотических белков Bax и Bcl-2, а так же рецепторов эстрогенов и прогестерона и плотность микрососудов в опухолях иммуногистохимическими методами. В этих же опухолях была оценена активность ферментов синтеза и метаболизма эстрогенов (ароматазы, стероид сульфатазы, суммарной эстроген 2/4-гидроксилазной активности, катехол-О- метилтрансфераза и глутатион-S-трансфераза) радиометрическими, радиоферментативными и спектрофотометрическими методами [5, 7, 11]. Проведенное исследование показало наличие взаимосвязи между экспрессией антиапопточеского протеина Bcl-2, интенсивностью неоангиогенеза, экспрессией рецепторов эстрогенов и прогестерона и активностью стероид сульфатазы в злокачественных новообразованиях эндометрия. Результаты являются основой для дальнейших исследований, посвященных индивидуальному прогнозированию течения рака эндометрия и формированию группы повышенного риска на основании определения комплекса иммуногистохимических маркеров и активности некоторых ферментов метаболизма эстрогенов.

 Список литературы

1.      Берштейн Л.М. Гормональный канцерогенез. СПб.: Наука, 2000. 199 с.

2.      Барышева Е.В., Анисеня И.И., Тюкалов Ю.И., Усов В.Ю. Оценка местной распространенности опухолей опорнодвигательного аппарата по данным сцинтиграфии с 99MТС-технетрилом. Медицинская визуализация. 2002. № 1. С. 114-121.

3.      Бочкарева Н.В., Коломиец Л.А., Чернышова А.Л. Нужна ли реабилитация больным с гиперпластическими процессами и раком эндометрия на фоне метаболического синдрома? Сибирский онкологический журнал. 2010. № 5. С. 71-77.

4.      Бочкарева Н.В., Кондакова И.В., Коломиец Л.А., Чернышова А.Л. Инсулиноподобные факторы роста и связывающие их белки в патогенезе рака эндометрия Сибирский онкологический журнал. 2008. № 3. С. 86- 93.

5.      Жеравин А.А., Селянинов К.В., Анисеня И.И., Богоутдинова А.В. Реконструкция костных дефектов при комбинированном лечении опухолей костей. Сибирский онкологический журнал. 2006. № 1. С. 70.

6.      Зырянов Б.Н., Афанасьев С.Г., Завьялов А.А. Интраоперационная лучевая терапия с использованием малогабаритного бетатрона. Российский онкологический журнал. 1998. № 6. С. 32-36.

7.      Павловская А.И., Кондратьева Т.Т., Петров С.В. и др. Морфологическая диагностика в распределении гистологических типов и вариантов рака легкого: анализ данных в рамках проекта «Гистологика». Вестник РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН. 2011. Т. 22. № 4. С. 97-105.

8.      Спирина Л.В., Кондакова И.В., Усынин Е.А., Коломиец Л.А., Винтизенко С.И., Бочкарева Н.В., Чернышова А.Л. Активность протеасом и содержание ростовых факторов при раке почки, мочевого пузыря и эндометрия. Российский онкологический журнал. 2010. № 1. С. 23-25

9.      Спирина Л.В., Кондакова И.В., Коломиец Л.А., Чернышова А.Л., Асадчикова О.Н., Шарова Н.П., Коваль В.Д. Активность протеасом и их субъединичный состав при гиперпластических процессах и раке эндометрия. Опухоли женской репродуктивной системы. 2011. № 4. С. 64-68.

10.   Чернышева А.Л., Коломиец Л.А., Крицкая Н.Г., Суходоло И.В. Прогностические критерии онкологического риска при пролиферативных процессах эндометрия. Российский онкологический журнал. 2005. № 3. С. 22-25.

11.   Чернышова А.Л., Коломиец Л.А., Крицкая Н.Г., Суходоло И.В. Апудоциты при пролиферативных процессах эндометрия. Сибирский научный медицинский журнал. 2005. Т. 25. № 3. С. 37-40.

12.   Чернышова А.Л. Прогноз и особенности клинического течения рака эндометрия на фоне метаболического синдрома. Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук / Научно- исследовательский институт  онкологии  Томского научного центра Сибирского отделения  Российской академии медицинских наук. Томск, 2009

13.   Чернышова А.Л., Коломиец Л.А., Красильников С.Э. Органосохраняющее лечение при инвазивном раке шейки матки. Сибирский онкологический журнал. 2011. № 2. С. 72-78.

14.   Чернышова А.Л., Ляпунов А.Ю., Коломиец Л.А., Чернов В.И., Синилкин И.Г. Определение сторожевых лимфатических узлов при хирургическом лечении рака шейки матки. Сибирский онкологический журнал. 2012. № 3. С. 28-33.

15.   Чернышова А.Л. Прогноз и особенности клинического течения рака эндометрия на фоне метаболического синдрома. Диссертация на соискание ученой степени доктора медицинских наук / ГУ "Научно- исследовательский институт онкологии Томского научного центра Сибирского отделения РАМН". Томск, 2009

16.   Чойнзонов Е.Л., Жуйкова Л.Д., Коломиец С.А., Тюкалов Ю.И. популяционный раковый регистр Томской области: возможности и перспективы. Врач и информационные технологии. 2012. № 3. С. 16-24.

17.   Dobrodeev A.Yu., Zav'yalov A.A., Musabaeva L.I., Tuzikov S.A., Miller S.V., Smyshlyaeva E.A. Results of the patients of the combined treatment of non-small cell lung cancer with intraoperative radioterapy and cysplatinum. Медицинская радиология и радиационная безопасность. 2004. Т. 49. № 6. С. 64-70.

18.   Musabaeva L.I., Lisin V.A., Zheravin A.A., Anisenya I.I., Bespalov V.I., Kol'chuzhkin A.M., Cheryashkina G.A. Radiation therapy in patients with locomotooor system tumors after organ-preserving surgery with implants from titanium alloys. Медицинская радиология и радиационная безопасность. 2003. Т. 48. № 2. С. 56-62.

19.   Spirina L.V., Yunusova N.V., Kondakova I.V., Kolomiets L.A., Koval V.D., Chernyshova A.L. ASSOCIATION OF GROWTH FACTORS, HIF-1 AND NF-κB EXPRESSION WITH PROTEASOMES IN ENDOMETRIAL CANCER. Molecular Biology Reports. 2012. Т. 39. № 9. С. 8655-8662.