К ВОПРОСУ ДИАГНОСТИКИ ЛЕЙКОЗА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА НА ПРЕДПРИЯТИЯХ ТЮМЕНСКОЙ ОБЛАСТИ

Лейкоз крупного рогатого скота (ЛКРС) - хроническое инфекционное заболевание, характеризуется  пролиферацией лимфоидных клеток и образованием опухолей в кроветворных органах и тканях. Возбудителем инфекции является РНК -  содержащий онковирус, семейства Retroviridae, подсемейства Oncoviridae, рода Deltaretrovirus. В клетку хозяина ретровирус встраивается в виде провирусной ДНК и пожизненно остается в организме животного. Источником инфекции является вирусоноситель или инфицированное животное с парентеральным и энтеральным путем передачи. Важными предрасполагающими факторами развития заболевания у животных является иммунологическая недостаточность и генетическая предрасположенность организма [2, c. 10; 7, с. 129; 6, с. 33].

Лейкоз животных приводит к снижению срока продуктивного использования коров, выбраковке животных, тем самым наносит значительный экономический ущерб в животноводстве [3, с. 48; 6, с. 33].

Распространение лейкоза на территории Тюменской области является одной из основных проблем в животноводстве [4, с. 14]. Динамика инфицированности и заболеваемости крупного рогатого скота в хозяйствах Тюменской области 1983-2014 гг. представлены на рисунке 1.

На протяжении последних лет, благодаря проводимым противолейкозным мероприятиям в рамках областной программы и комплексного плана наблюдается снижение заболеваемости [5, 611с.].

Однако необходимо стремится к полному выведению провируса лейкоза из популяционных генофондов крупного рогатого скота Тюменской области.

На протяжении многих лет для обнаружения заболевания в стадах животных применяются различные методы диагностики: реакция иммунной диффузии (РИД), иммуноферментный анализ (ИФА) и гематологические исследования. В настоящее время в связи с развитием молекулярной генетики появилась возможность диагностировать лейкоз крупного рогатого скота на генном уровне. ДНК - диагностика методом полимеразной цепной реакции  (ПЦР) провируса лейкоза животных по сравнению с другими методами является прямым, специфичным и высокочувствительным методом. ПЦР - это многократно повторяющиеся циклы синтеза специфической области провирусной ДНК лейкоза в присутствии термостабильной ДНК-полимеразы, дезоксинуклеотидфосфатов, солевого буфера и нуклеотидных праймеров, определяющих границы синтезируемого участка. Метод ПЦР позволяет в течение нескольких часов специфично увеличивать (амплифицировать) копийность провируса в геноме животного в сотни раз [1, с. 33; 7. с. 129].

Особенно актуальна диагностика заболевания у телят до шестимесячного возраста. Использование методов РИД и ИФА в данном случае невозможно [2, с. 3]. ПЦР анализ является альтернативным способом определения лейкоза животных на ранних (с десятидневного возраста) или скрытых стадиях заболевания, независимо от физиологического состояния (до и после отела). Идентификация вируса на уровне генома позволяет с высокой степенью достоверности определить степень распространения больных и вирусоносителей в стаде [7, с. 131].

В ряде случаев интерпретация результатов является весьма затруднительной. В публикациях научных работ зарубежных и отечественных авторов были отмечены несовпадения результатов РИД и ПЦР диагностики по выявлению лейкоза у крупного рогатого скота. В 10% случаев у серопозитивных и РИД - положительных животных при использовании метода ПЦР диагноз не был подтвержден. На основании полученных результатов были даны рекомендации о необходимости проведения комплексных исследований в диагностике лейкоза. В работах отечественных авторов разночтения результатов связывают с несколькими причинами. Первая причина - малое количество ДНК у больных особей в стадии алимфатического или персистирующего лимфацита. Низкий уровень чувствительности ПЦР, региональная вариабельность провирусной ДНК в образцах и генотипическая неоднородность вируса могли послужить второй причиной несоответствия результатов [8, с. 72].

Таким образом, несмотря на возникшие затруднения в диагностике заболевания лейкозом у животных, ПЦР – анализ является существенным и необходимым дополнением к существующим методам диагностики.

Комплексное применение методов идентификации провирусной ДНК лейкоза позволит добиться оздоровления неблагополучных пунктов и снизить уровень инфицированности заболеванием на территории Тюменской области [5, 611 с.].

Молекулярно–генетическая лаборатория Агробиотехнологического центра ГАУ Северного Зауралья диагностирует провирус лейкоза на уровне ДНК крупного рогатого скота, разводимого в хозяйствах Тюменской области, с целью выявления заболевания в латентной стадии и стадии вирусоносителей. Применение ПЦР диагностики в совокупности с традиционными методами, позволит эффективно идентифицировать лейкоз крупного рогатого скота и снизить уровень заболеваемости в Тюменской области.

Список литературы

1.                   Бойко Е.Г. Перспективы использования геномного анализа при разведении и селекции крупного рогатого скота // Аграрный вестник Урала. 2009. № 10 (64). С. 33 - 34.

2.                   Виноградова И.В. ДНК – диагностика вируса лейкоза крупного рогатого скота (ВЛКРС) и связь статуса коров по ВЛКРС с генеалогической принадлежностью и уровнем молочной продуктивности. Автореферат диссертации. Дубровицы, 2012. 19 с.

3.                   Гладырь Е.А., Зиновьева Н.А., Быков А.С., Виноградова И.В., Эрнст Л.К. Молочная продуктивность коров в зависимости от инфицированности вирусом лейкоза и генотипа по BoLA – DRB3 // Достижения науки и техники АПК. 2012. № 8. С. 46 – 48.

4.                   Глазунов Ю.В. Ретроспективный анализ эпизоотической ситуации по лейкозу крупного рогатого скота в Северном Зауралье // Ветком. 2014. № 3. С. 14 – 15.

5.                   Глазунов Ю.В., Глазунова Л.А. Лейкоз крупного рогатого скота в Тюменской области // Современные проблемы науки и образования . 2015. № 3. 611 с.

 6.                   Карамзина А.А., Глазунова Л.А., Глазунов Ю.В. Эпизоотическая обстановка по лейкозу КРС и эффективность противолейкозных мероприятий в Тавдинском районе Свердловской области // Вестник ГАУ Северного Зауралья. 2016. № 2. С. 32 – 38.

 7.                   Мальцева Н.А., Шайхаев Г.О., Ирский А.Г., Постовой С.Г., Животов А.А., Шлычков Е.Е., Ерёмин В.Ф. ПЦР – диагностика лейкоза крупного рогатого скота // Ветеринарная патология. 2003.№ 1. С. 129 – 131.

 8.                   Чичинина С.В., Храмцов В.В., Смирнов П.Н., Дурыманова Е.А., Белявская В.А. Возможности и ограничения использования полимеразной цепной реакции (ПЦР) в диагностике вируса лейкоза крупного рогатого скота // Вестник Российской сельскохозяйственной науки. 2006.№ 6. С.71 – 73.