04 марта 2016г.
В настоящее время правительством Российской Федерации поставлена задача увеличения ассортимента отечественных медикаментов. Поэтому актуальным является вопрос создания эффективных и недорогостоящих лекарственных форм. Нами разработан технологический процесс изготовления мази «Лидозоль», состоящей из 0,3 г лидокаина гидрохлорида и 9,7 г геля «Тизоль». Лекарственная форма может найти широкое применение в медицинской практике как местное анестезирующее, противовоспалительное, антисептическое средство в хирургии, гинекологии, стоматологии физиотерапии и педиатрии. Создание нового препарата должно сопровождаться разработкой способов анализа, которые позволят установить доброкачественность приготовления мази «Лидозоль». Для этого применили химические реакции и спектрофотометрию.
Проводили исследования, позволяющие лидокаина гидрохлорид качественно открывать в мази по образованию в молекуле первичного ароматического амина после кислотного или щелочного гидролиза лекарственного препарата и выполняли реакции образования азосоединений, шиффовых оснований. Кроме того, проводили анализ с рядом окислителей в кислой среде с получением цветных соединений, общих алкалоидных реактивов, а также изучали способность водорода в ароматическом ядре замещаться на галоген. Для проведения реакций готовили раствор лекарственного препарата на разведенной хлороводородной кислоте и реактивы по методикам, приведенным в государственных фармакопеях X и XII издания.
Методика обнаружения лидокаина гидрохлорида в «Лидозоли» по реакции азосочетания: навеску мази, равную около 0,5 г, растворяют в 5 мл 2 моль/л раствора хлороводородной кислоты и кипятят раствор на водяной бане или пламени газовой горелки 2 - 3 мин. Далее, 3 – 5 кап. полученной смеси переносят в пробирку, прибавляют 3 - 5 кап. 0,1 моль/л раствора нитрита натрия, 1 - 2 кап. b-нафтола и наблюдают появление красной окраски. Чувствительность реакции равна 0,5 мг/мл.
Лидокаина гидрохлорид в лекарственной форме качественно можно обнаружить по реакции образования азометиновых соединений: 0,3 г мази растворяют в 5 мл 2 моль/л раствора хлороводородной кислоты и получают 2,6-триметиланилин кипячением раствора 2 - 3 мин. К 2 мл полученной смеси прибавляют 3 мл этанольного раствора n-диметиламинобензальдегида с массовой долей 2 %. Раствор окрашивается в желтый цвет за счет образования красителя. Аквакомплекс глицеросольвата титана (мазевая основа), перешедшая в раствор, не мешает проведению реакции идентификации на лидокаина гидрохлорид.
Методика реакции с фосфорновольфрамовой кислотой: навеску мази, равную около 0,3 г, растворяют в 10 мл разбавленной хлороводородной кислоты. Далее, к 3 мл полученной смеси прибавляют 2 - 3 кап. раствора реактива. Выпадает белый осадок вольфрамофосфата лидокаина. Чувствительность реакции составляет 0,01 мг/мл.
Аналогичную реакцию можно проводить с раствором фосфорномолибденовой кислоты. Продукт реакции - осадок зеленого цвета. Чувствительность реакции равна 0,02 мг/мл.
При идентификации лидокаина гидрохлорида в мази «Лидозоль» по реакции с реактивом Драгендорфа:
навеску лекарственной формы равную около 0,5 г переносят в стаканчик, добавляют 5 мл 95 % этилового спирта, 5 мл 8,3 % раствора разведенной хлороводородной кислоты. К 1 мл полученного раствора прибавляют 1 мл реактива. Наблюдают появление оранжевого осадка комплексного соединения. Чувствительность реакции равна 12 мкг/мл.
Способ обнаружения лидокаина гидрохлорида по реакция бромирования: навеску мази, равную около 0,5 г, растворяют в 5 мл разбавленной хлороводородной кислоты. Далее, 1 мл полученной смеси переносят в пробирку, в которой находится 1 мл бромата калия с молярной концентрацией эквивалента 0,1 моль/л, 1 мл 10 % раствора бромида калия и 1 мл разбавленной хлороводородной кислоты. В результате реакции через 1 - 2мин. выпадает белый осадок дибромлидокаина.
Реакция с реактивом Бушарда: навеску мази, равную около 0,3 г, растворяют в 5 мл разбавленной хлороводородной кислоты. Далее, 2 мл полученной смеси переносят в пробирку, прибавляют 5-10 кап. реактива и наблюдают выпадение осадка бурого цвета. Чувствительность реакции составляет 0,03 мг/мл. Аналогичная реакция в этих же условиях протекает с реактивом Вагнера.
Лекарственная форма приготовлена на основе геля «Тизоль», в состав которого входит аквакомплекс глицеросольвата титана TiO4(C3H8O2)4(C3H7O3)10 · 40 H2O.
Поэтому гель в мази «Лидозоль» обнаруживали по реакциям на наличие иона титана (IV) и глицерина. Предложено наличие титана (IV) в Тизоле определять по реакции его с салициловой кислотой. Методика: 0,5 г мази растворяют в 5мл 8 % раствора хлороводородной кислоты, далее к 2 мл полученного раствора прибавляют 3 мл 1 % спиртового раствора салициловой кислоты. В результате реакции образуется раствор комплексного соединения салицилата титана желтого цвета различного состава в зависимости от рН среды. Комплексы образуются при рН 2 - 4 в молярных соотношениях титана и салицилата 1:1, 1:2 и 1:3.
Присутствие титана (IV) в молекуле тизоля можно устанавливать также при сжигании и прокаливании в тигле 0,5 г мази в течение 1 часа при температуре муфельной печи 650° С. Остаток после сжигания окрашивается в ярко-желтый цвет. При охлаждении окраска исчезает.
Для обнаружения титана (IV) предложено использовать реакцию с 3 % раствором пероксида водорода. Методика: к 0,5 г мази прибавляют 5 мл 2моль/л раствора серной кислоты и 5 мл пероксида водорода. Получается продукт оранжевого цвета, максимально поглощающий свет при длине волны 410 нм. Аналитический эффект реакции обусловлен образованием комплексных соединений [TiOH2O2]SO4 и [Ti(OН)2H2O2]SO4, что не противоречит литературным данным по образованию подобных соединений.
Для обнаружения глицерина: 0,5 г мази растворяют в 5 мл 95 % этилового спирта и 5 мл 10 % раствора натрия гидроксида. К 2 мл полученного раствора прибавляют 1 мл раствора меди (II) сульфата. В результате реакции раствор окрашивается в сине-фиолетовый цвет, обусловленный образованием натриевой соли глицерата меди (II).
Данные исследования позволяют идентифицировать ингредиенты мази «Лидозоль», поэтому приведенные методики можно рекомендовать для включения в нормативную документация в раздел качественного анализа.
С целью получения дополнительной информации об изучаемых соединениях прописи провели спектрофотометрические исследования. Характер спектров поглощения в УФ области зависит от pH среды. Особое влияние оказывает значение водородного показателя на π→π* электронные переходы, так как происходит протонизация ионизированных групп. Спектры поглощения изучали с помощью отечественного спектрофотометра СФ-2000 в пределах длин волн от 190 нм до 280 нм. Оптическую плотность растворов лекарственного препарата измеряли в кювете с толщиной рабочего слоя 10 мм через 5 нм, а вблизи максимумов и минимумов светопоглощения – через 1 нм.
Спектр поглощения лидокаина гидрохлорида в 0,1 моль/л растворе хлороводородной кислоты (катионная форма) имеет одну высокоинтенсивную полосу с максимумом поглощения при длине волны 201 нм (e =27750) и минимум - при λ = 260 нм (e = 500). Спектр поглощения лекарственного препарата при рН = 1 приведен на рисунке (кривая 1). УФ-спектр поглощения препарата при pH = 13 имеет один максимум светопоглощения при длине волны 216 нм (e =11750) и минимум - при λ = 260 нм (e =500). Полоса светопоглощения молекулярной формы лекарственного препарата смещена батохромно на 15 нм по сравнению с максимумом светопоглощения катионной формы и наблюдается гипохромный эффект (кривая 2). УФ-спектр поглощения лидокаина гидрохлорида в этаноле (кривая 3) имеет одну полосу поглощения с максимумом при λ = 203 нм (e =25250).
Полученные спектры поглощения лидокаина гидрохлорида позволили рассчитать оптические характеристики катионной и молекулярной форм. Приведенные в таблице показатели заметно отличаются друг от друга, что позволяет использовать их для идентификации лекарственного препарата в субстанции и мази «Лидозоль».
