04 декабря 2016г.
Основным биологическим аккумулятором минеральных веществ являются растения. Они поглощают минеральные вещества из почвы и других субстратов своей корневой системой и с помощью транспирационного тока воды обеспечивают ими ткани и органы (семена, плоды, листья, стебли) растительного организма. Минеральные вещества, попадая в организм человека, выполняют функцию регуляторов основных процессов жизнедеятельности (Физиология растений, 2005). Начиная со второй половины 20-го века, началось активное исследование минерального состава лекарственных растений и выявление роли макро- и микроэлементов в жизнедеятельности организма человека (Ковальский, 1976; Ноздрюхина, 1983).
Для сохранения биоразнообразия и получения необходимого количества лекарственного растительного сырья, всё чаще используют методы биотехнологии, в частности культуру ткани и гидропоническое выращивание (патент РФ 2570623).
Цель настоящих исследований – определить содержание микроэлементов-биофилов (Fe, Mn, Zn, Cu), тяжелых металлов (Pb, Cd, Sb, Be, Hg, Cr, Ni) и As в сырье Iris sibirica L., выращенном в гидропонике сопряжённой с микроклональным размножением.
Элементный состав растений видоспецифичен, зависит от многих факторов окружающей среды и может варьировать в довольно широких пределах. Количество поглощенных веществ зависит от условий выращивания и от концентрации ионов в среде. В качестве объекта исследования в наших опытах использовали образцы растений- регенерантов I. sibirica сорт Cambridge и сорт Стерх, размноженные микроклонально. Растения-регенеранты I. sibirica в течение 30 пассажей выращивали на питательной среде с минеральной основой Мурасиге-Скуга (MS), дополненной 2-10 мкМ 6- бензиламинопурина и 1,0 мкМ нафтилуксусной кислоты.
Воздушно-сухие образцы корней, корневищ, листьев предварительно измельчали на мельнице и просеивали через сита. Для исследования использовали фракцию размером 0,15-0,63 мм. Исследование элементного состава проводили на атомно-эмиссионном ИСП-спектрометре Optima 7300 DV фирмы Perkin Elmer (США).
Результаты исследований свидетельствуют о специфических особенностях обмена у растений-регенерантов исследуемого вида ирис, что приводит к определённому уровню содержания биофильных элементов в тканях их органов. Отмеченные закономерности, по нашему мнению, можно объяснить не только биохимической ролью металлов в растениях, способами их поглощения и переноса, но содержанием в искусственной питательной среде.
Количественной мерой интенсивности накопления химических элементов растениями является коэффициент накопления (Кн - отношение содержание элемента в органах к содержанию в среде), отражающий степень биофильности элементов, а также интенсивность их вовлечения в биологический круговорот. На основе полученных данных Fe, Mn, Zn, Cu определены как элементы энергичного накопления (табл. 1).
Многолетние исследования доказали высокую эффективность гидропонического выращивания растений сопряжённого с микроклональным размножением. Размноженный в культуре ткани растительный материал освобождён от грибных и бактериальных инфекций, имеет более высокую силу роста в регулируемых условиях питания и факторов внешней среды, но при этом элементный состав и содержание тяжёлых, токсичных металлов в сырье на сегодняшний день не изучено.
Таблица 1. Коэффициент накопления (Кн) химических элементов в органах растений-регенерантов I. sibirica на питательной среде Мурасиге-Скуга
Элемент
|
Содержание
в питательной среде MS мг/кг
|
Cambridge
|
Стерх
|
листья
|
корни и
корневища
|
листья
|
корни и
корневища
|
сод-е,
мг/кг
|
Кн
|
сод-е,
мг/кг
|
Кн
|
сод-е,
мг/кг
|
Кн
|
сод-е,
мг/кг
|
Кн
|
Fe
|
5,6
|
215,9
|
38,6
|
353,8
|
63,2
|
280,8
|
50,1
|
440,0
|
78,6
|
Mn
|
5,5
|
166,6
|
30,3
|
77,1
|
14,0
|
175,8
|
32,0
|
108,4
|
19,7
|
Zn
|
1,9
|
74,3
|
39,1
|
54,6
|
28,7
|
91,9
|
48,4
|
65,1
|
34,3
|
Cu
|
0,01
|
1,1
|
110,0
|
0,6
|
60,0
|
0,8
|
80,0
|
1,2
|
120,0
|
Примечание. Прочерк – нет данных.
Оценивая растения-регенеранты I. sibirica как источник получения лекарственного растительного сырья, отмечали особенность накопления микроэлементов в культуре in vitro. Так в листьях растений-регенерантов Cambridge содержание марганца в 10,7 раз больше, чем у интактных растений, а в корнях и корневищах превышение составляло в 3,1 раза. Такую тенденцию наблюдали и для I. sibirica сорт Стерх. Листья интактных растений содержали 18, 5 мг/кг Mn, а растений-регенерантов - 175,8 мг/кг, что в 9,5 раз больше. В корнях и корневищах интактных растений сорта Стерх определяли 15,8 мг/кг Mn, у растений-регенерантов - 108,4 мг/кг, превышение составило 6,8 раз.
Уровень содержания марганца у некоторых лекарственных растений Северного Алтая колеблется от 5 до 746 мг/кг (Ельчининова, 2008). Растения, концентрирующие марганец, применяют для профилактики сердечно-сосудистых заболеваний, для поддержания нормальных функций половых желез и опорно-двигательного аппарата, нервной системы.
Химические элементы растений в высоких концентрациях могут проявлять токсическое действие. Содержание микроэлементов в регенерантах I. sibirica сравнивали с допустимыми нормами в растениях. Изученные нами микроэлементы-биофилы Fe, Mn, Zn находились на уровне средних значений для растительности континентов, Cu - значительно ниже. Содержание тяжелых металлов Pb, Cd, Cr, Be, Ni и As не превышало нормального уровня в растениях, а для Sb необходимо провести дополнительные исследования. Так по данным О.А. Ельчининовой и её коллег (2008) содержание сурьмы в лекарственных растениях экологически чистого региона Северного Алтая находилось от 0,038 мг/кг до 6,6 мг/кг сухого вещества. Свинец в образцах I. sibirica не обнаружен (табл. 2).
Таблица 2. Содержание микроэлементов в растениях-регенерантах Iris sibirica L. и нормирование содержания, мг/кг сухого вещества
Показатель
|
Fe
|
Mn
|
Zn
|
Cu
|
Pb
|
Cd
|
Sb
|
Be
|
Cr
|
Ni
|
As
|
Содержание в растениях-регенерантах
|
Cambridge
листья
|
215,9
|
166,6
|
74,3
|
1,1
|
2,5
|
˂0,001
|
0,25
|
0,005
|
<0,1
|
0,3
|
0,2
|
Cambridge
корневище
|
353,8
|
77,1
|
54.6
|
0,6
|
1,5
|
˂0,001
|
0,21
|
0,006
|
<0,1
|
0,2
|
0,3
|
Стерх
листья
|
215,9
|
175,8
|
91,9
|
0,8
|
3,3
|
˂0,001
|
0,2
|
0,004
|
<0,1
|
0,2
|
0,3
|
Стерх
корневище
|
440,0
|
108,4
|
65,1
|
1,2
|
0,9
|
˂0,001
|
0,4
|
0,004
|
<0,1
|
0,4
|
0,07
|
Нормирование содержания
(Ильин, 1991; СанПин 2.3.2.560-96, 2.3.2.1078-01; Добровольский, 1997; Сосорова и др., 2016)
|
Низкое
|
˂50
|
˂20
|
˂20
|
˂5
|
-
|
-
|
-
|
-
|
-
|
-
|
-
|
Нормально
е
|
50-
250
|
25-
250
|
25-
250
|
6-15
|
2-
14
|
0-0,5
|
-
|
-
|
0-0,5
|
0-8
|
-
|
Токсическ
ое
|
-
|
˃500
|
˃400
|
˃20
|
-
|
˃100
|
-
|
-
|
-
|
˃80
|
-
|
Среднее в
р.к.
|
200
|
205
|
30
|
8,0
|
1,25
|
0,035
|
0,06
|
0,01
|
1,8
|
2,0
|
0,5
|
ПДК для
БАД
|
-
|
-
|
-
|
-
|
6,0
|
1,0
|
-
|
-
|
-
|
-
|
-
|
ПДК для
чая
|
-
|
-
|
-
|
100
|
10,0
|
1,0
|
-
|
-
|
1,0
|
-
|
3,0
|
Примечание. Прочерк – нет данных. Среднее р.к. – средне в растительности континентов
В исследованных образцах I. sibirica сорт Cambridge и Стерх, концентрация Cu, Pb, Cd, Cr и As не превышала допустимый уровень для БАДов и чая на растительной основе (СанПин 2.3.2.560-96, СанПин 2.3.2.1078-01). Допустимые уровни токсичных элементов непосредственно для лекарственных растений в литературе нами не найдены.
Список литературы
1. Добровольский В.В. Биосферные циклы тяжёлых металлов и регуляторная роль почвы // Почвоведение. 1997. №4. С. 431-441.
2. Ельчининова О.А., Рождественская Т.А., Черных Е.Ю. Микроэлементы-биофилы и тяжёлые металлы в лекарственных растениях Северного Алтая // В сборнике: Биоразнообразие, проблемы экологии Горного Алтая и сопредельных регионов: настоящее, прошлое, будущее. Материалы Международной конференции. 2008. С. 51-55.
3. Ермаков И.П. Физиология растений. М., 2005, с. 637
4. Ковальский В.В. Геохимическая среда, здоровье, болезни /В кн.: Физиологическая роль микроэлементов. Рига, 1976.
5. Ильин В.Б. Тяжёлые металлы в системе почва-растение. Новосибирск, 1991. 151 с.
6. Ноздрюхина Л.Р. Геохимическая среда, здоровье, заболевания сердечно- сосудистой системы // Сб. Биологическая роль микроэлементов. М., 1983. С. 182– 187.
7. Патент №2570623 (РФ). Способ получения лекарственного растительного сырья лапчатки белой (Potentilla alba L) в условиях гидропоники / Л.И. Тихомирова, Н.Г. Базарнова / 2015.
8. СанПин 2.3.2.560-96. Гигиенические требования к безопасности и пищевой ценности продуктов. М., 1996.
9. СанПин 2.3.2.1078-01. Гигиенические требования к безопасности и пищевой ценности продуктов. М., 2001.
10. Сосорова С.Б., Меркушева М.Г., Убугунов Л.Л. Содержание микроэлементов в лекарственных растениях разных экосистем озера Коктокельского (Западное Забайкалье) // Химия растительного сырья. 2016. №2. С. 53-59.