29 ноября 2015г.
Частота встречаемости миомы матки у женщин старше 35 лет, по данным разных авторов, составляет от 25 до 50% [3]. Большая часть женщин, больных миомой матки, страдает от сопутствующей течению миомы кровопотери [8].
В настоящий момент остаѐтся открытым вопрос о механизме возникновения маточных кровотечений. Известно, что активация перекисного окисления липидов является патогенетической основой развития многих патологических состояний. В связи с чем, нам представилось интересным изучить особенности ферментативной антиоксидантной защиты (АОЗ) при миоме матки, осложненной кровотечением.
Для изучения характера изменений обмена веществ в эритроцитах при миоме матки, осложненной кровотечением без нарушения компонентов свѐртывающей системы (протромбиновый индекс, время свѐртывания, фибриноген) проведены исследования у 70 женщин, которые были разделены на две группы.
Контрольная группа представлена 33 практически здоровыми женщинами, без сопутствующей гинекологической патологии. Средний возраст 45±3,5 лет. Клиническая группа представлена 37 женщинами в возрасте 46±2,8 лет с миомой матки, осложненной кровотечением (субмукозная или интерстициальная локализация миоматозного узла или узлов). Уровень гемоглобина у женщин клинической группы по данным общего анализа крови не выходил за границы нижней нормы для женщин. Женщины проходили лечение в отделении гинекологии РостГМУ, где был верифицирован диагноз.
Объектом исследования были выбраны эритроциты венозной крови. Забор крови осуществлялся натощак из локтевой вены (с добавлением гепарина). Для определения активности ферментов в клетках крови использовали 20% гемолизат, приготовленный на бидистилированной воде.
Для оценки антиоксидантной системы организма в эритроцитах колориметрически определяли активность основных ферментов АОЗ: супероксиддисмутазы (СОД) [КФ 1.15.1.1] по методу H.P. Misra, J. Fridovich в модификации О.Г. Саркисяна [11, 9], каталазы [КФ 1.11.1.6] по методу М.А. Королюк [4], глутатионпероксидазы (ГПО) [КФ 1.11.1.9] по методу В.М. Моина [7], глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы (гл-6-ф-ДГ) [КФ 1.1.1.49] по Захарьину Ю.Л. [2]; содержание восстановленного глутатиона (GSH) по G.L. Ellman [12] на фотоэлектроколориметре КФК-2МП (Россия), а также активность глутатионредуктазы (ГР) [КФ 1.8.1.7] спектрофотометрически по Юсуповой Л.Б. [10] на СФ-46 (ЛОМО, Россия). Активность ферментов в гемолизате пересчитывали на мкМоль/г Нв.
Статистическую обработку экспериментальных данных проводили согласно общепринятым методам с определением средней арифметической, ошибки средней с использованием программы STADIA версия 6.0 [5] на персональном компьютере IBM PC 486 DX4-100. О достоверности отличий учитываемых показателей контрольной и опытной групп судили по величине t-критерия Стьюдента после проверки распределения на нормальность. Статистически достоверными считали отличия, соответствующие оценке ошибки вероятности р<0,05.
Доказано, что кровь, как ткань полифункциональная и интегрирующая все среды организма, отражает изменения, происходящие во всех тканях и органах, а эритроциты, представляющие универсальную модель, достаточно точно отражают изменения в других клеточных структурах [l]. В ходе исследования было установлено, что при миоме матки, осложнѐнной кровотечением, в сравнении с контрольной группой, активность СОД увеличена на 85% (p<0,01) на фоне достоверного снижения активности каталазы на 11% (p<0,05).
Известно, что СОД является индуцибельным ферментом, поэтому активация СОД может свидетельствовать о повышенном образовании супероксидного анионрадикала, а также об образующейся в ходе реакции перекиси водорода. Известно, что перекись водорода – источник гидроксильного радикала, инициирующего процесс перекисного окисления липидов (ПОЛ). Фермент каталаза расщепляет перекись водорода до воды и кислорода. Нами выявлено снижение активности каталазы, что свидетельствует о накопления перекиси водорода.
Известно, что гиперпродукция Н2О2 способствует формированию эндотелий-независимой вазодилатации, т.к. перекись водорода является фактором гиперполяризации эндотелиоцитов. С одной стороны, это может привести к улучшению процессов циркуляции и способствовать улучшению трофики опухолевого узла, а с, другой стороны, данный факт может провоцировать кровотечение, развивающееся при миоме матки.
Направленность изменений ферментативной активности второй линии АОЗ при миоме матки, осложненной кровотечением, выражается в существенной активации ГПО на 145% (р<0,01) относительно значений контрольной группы, а концентрация восстановленного глутатиона и активность ГР имеют тенденцию к снижению в сравнении с показателями контрольной группы. Учитывая, что ГПО обладает псевдокаталазной активностью, а также способностью нейтрализовать гидроперекиси высших жирных кислот, выраженная активация данного фермента свидетельствует о существенном вкладе второй линии АОЗ в остановке процесса перекисного окисления липидов.
Также в клинической группе зарегистрировано повышение активности глюкозо-6-фосфат-дегидрогеназы на 75,72% (р<0,01) относительно контрольной группы [6]. Очевидно, активация пентозо-фосфатного пути направлена на поддержание глутатионзависимого звена ферментативной АОЗ, т.к. образующиеся в данном процессе восстановленные эквиваленты НАДФН2 идут на восстановление окисленного глутатиона, являющегося коферментом ГПО. Существенная активация ГПО на фоне снижении концентрации восстановленного глутатиона может свидетельствовать о значительном расходование последнего не только в реакции обезвреживания гидроперекисей ВЖК, но и в качестве ловушки свободных радикалов за счет наличия тиогрупп в его структуре. Учитывая разнонаправленную активацию ферментов второй линии АОЗ, можно судить о дисбалансе в работе второго звена АОЗ.
Таким образом, нами выявлен дисбаланс в работе ферментов первой и второй линии антиоксидантной защиты. Патогенетически значимым можно считать накопление перекиси водорода вследствие существенной активации СОД на фоне ингибирования каталазы, поскольку эндотелий-зависимая вазодилятация может быть одним из факторов, провоцирующих кровотечение, осложняющее течение миомы матки.
Список литературы
1. Гольдберг Е.Д., Крыжановский Г.Н. Дизрегуляционная патология системы крови. – М.: ООО«Медицинское информационное агентство», 2009. - 432 с.
2. Захарьин Ю.Л. Метод определения активности глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы // Лаб. дело. – 1967. - №6.– С.327-330.
3. Кичигин О.В., Арестова И.М., Занько Ю.В. Факторы риска развития миомы матки и качество жизни пациенток, оперированных по поводу миомы матки // Охрана материнства и детства. – 2013. - №2(22). – С.36-41.
4. Королюк М.А., Иванова Л.И., Майорова И.Г., Токарев В.Е. Метод определения активности каталазы // Лаб. Дело. – 1988. - №1. - С.16-19.
5. Кулайчев А.П. Методы и средства анализа данных в среде Windows Stadia 6.0. М. 1996.
6. Микашинович З.И., Саркисян О.Г., Коваленко Т.Д. Состояние различных форм воды и ферментов антиоксидантной защиты в эритроцитах крови у женщин, больных миомой матки // Экологический вестник научных центров черноморского экономического сотрудничества. – 2008. - №8. – С.677.
7. Моин В.М. Простой и специфический метод определения активности глутатионпероксидазы в эритроцитах
// Лаб. дело. – 1986. - №12. –С.724-727
8. Савицкий Г.А. Роль локальной гиперэстродиолемия в патогенезе возникновение и роста миомы матки // Журнал акушерства и женских болезней. -2009. - T. LVIII, вып. 4. – С.79-92.
9. Саркисян О.Г. Биохимические изменения при атрофических кольпитах и их коррекция: Дис… канд. мед.наук. Ростов-на-Дону. - 2000. – 125 с.
10. Юсупова Л.Б. О повышении точности определения активности глутатионредуктазы эритроцитов // Лаб. дело. – 1989. - №4. – С.19-21.
11. Misra H.P., Fridovich I. Superoxide dismutase // Biol. Chem. – 1972, Vol. 247. – P.188.
12. Ellman G.L. Tissue sulfhydryl groups // Arch. Biochem. Biophys. – 1959, Vol. 82. – Р.70-77.
