20 декабря 2017г.
С целью уменьшения времени эксперимента, сокращения количества опытов и объективного установления оптимальных условий хроматографического разделения, теоретически был обоснован выбор достоверных и унифицированных систем растворителей для каждой исследуемой лекарственной формы с использованием критерия W.
Для установления доверительных границ определения величин Rf по каждому компоненту смеси считали, что они подчиняются закону нормального распределения. Чтобы проверить соответствие значений Rf с нормальным теоретическим распределением использовался критерий W.
Предварительно были выбраны 15 систем растворителей (Таблица 6), из которых 9 систем растворителей оказались оптимальными для идентификации папаверина гидрохлорида и дибазола в присутствии других компонентов лекарственных форм (Таблица 1).
Таблица 1
Исследуемые системы растворителей
|
№№
|
Растворители
|
Соотношение
растворителей
|
|
I
|
Хлороформ – этанол (пары аммиака*)
|
4:1
|
|
II
|
Хлороформ – ацетон – раствор аммиака*
|
10:20:1,5
|
|
III
|
Эфир – метанол – раствор аммиака*
|
12:1:0,5
|
|
IV
|
Этилацетат – бензол – метанол
|
1:1:1
|
|
V
|
Хлороформ – ацетон
|
3:7
|
|
VI
|
Эфир – этилацетат – раствор аммиака*
|
4:1:0,5
|
|
VII
|
Бензол – ацетон
|
1:1
|
|
VIII
|
Этилацетат – эфир
|
1:4
|
|
IX
|
Хлороформ – эфир – этилацетат
|
1:2:3
|
*-концентрированный раствор
При проведении выбора условий разделения для всех компонентов, проверку согласия опытного распределения с теоретическим, осуществляли для каждого препарата. Ниже приведены поиски оптимальных систем растворителей на примере бендазола гидрохлорида для лекарственной формы состава:
Папаверина гидрохлорида Бендазола гидрохлорида
Фенобарбитала по 0,02
Метамизола-натрия 0,25
Значения величин Rf бендазола гидрохлорида располагали в порядке их возрастания, получая упорядоченную выборку X 1≤ X 2….≤ X n, где объем выборки n=9, а системы растворителей располагали по мере уменьшения величины Rf (Таблица 2).
Критическая область проверки критериев W для уровня значимости 0,01 по готовым табличным данным критериев составляет W* =0,764, таким образом, значения W > W* (или 1,885 > 0,764) означает, что
гипотеза справедлива.
Далее проводили определение доверительных границ для величин Rf в избранных нами системах растворителей
(Таблица 3)
Таким образом, результаты наблюдений
не представляют доказательства о несоответствие проверяемой гипотезы. В пределах
доверительных
границ находятся
значения
величин
Rf бендазола гидрохлорида для всех систем растворителей кроме
IX (Таблица 4) .
Аналогично рассчитывали пределы доверительных границ значения величин Rf для папаверина гидрохлорида (αн = 0,21, αв = 0,65), фенобарбитала
(αн = 0,27, αв = 0,67). Для метамизола-натрия величина Rf в изучаемых системах растворителей близка к нулю, поэтому проводить оценку достоверности унифицированных систем нецелесообразно.
Таблица 4
Значения величин Rf бендазола гидрохлорида, полученные опытным путем
|
Бендазола
гидрохлорид
|
I
|
II
|
III
|
IV
|
V
|
VI
|
VII
|
VII
|
IX
|
|
Величины Rf 10-2
|
|
0,78
|
0,70
|
0,70
|
0,65
|
0,62
|
0,48
|
0,48
|
0,47
|
0,40
|
При сравнении экспериментальных данных (Таблица 4) с теоретическими результатами нормального распределения определено, что системы растворителей №№ I – III являются оптимальными, поскольку значения показателей для них в наибольшей степени достоверны.
Унифицированной следует считать систему растворителей III: эфир – метанол – аммиака растворконцентрированный (12:1:0,5), с помощью которой проводится идентификация в
7
изучаемых лекарственных формах аптечного и заводского изготовления (Таблица 5).
В качестве основных элюирующих компонентов были выбраны хлороформ, эфир диэтиловый,
этилацетат и бензол, обладающие средней элюирующей активностью. К элюентам добавляли полярные
органические растворители: этанол 95%, метиловый
и н-бутиловый спирты, ацетон и др. Поскольку в состав
изучаемых смесей лекарственных веществ входят соли органических азотистых оснований и их соли, то в
системы растворителей как основную добавку вводили концентрированный раствор аммиака. Образующиеся основания гидрофобны и подвижность их относительно тонкого слоя сорбента увеличивается (Таблица 6).
Таблица 6
Результаты разделения изучаемых соединений
методом ТСХ
|
Системы
растворит
елей
|
Препараты
|
|
Папаве
рина
гидрох
лорид
|
Бендазо-
ла гидрохл
орид
|
Метами-
зол натрий
|
Фено-
бар- битал
|
Амино-
филлин
|
Кофе-
ин- бензоат
натрия
|
Глюко-
за
|
Сахар
|
Теобро
-мин
|
|
Значения
величин Rf · 10-2 (n= 15)*
|
|
I
|
88
|
78
|
2
|
17
|
17
|
81
|
4
|
5
|
53
|
|
II
|
65
|
70
|
0
|
27
|
4
|
50
|
0
|
0
|
21**
|
|
III
|
47
|
70
|
0
|
24
|
4
|
34
|
0
|
0
|
14
|
|
IV
|
56
|
65
|
2
|
72
|
48
|
а)42
б) 66
|
22
|
12
|
39
|
|
V
|
11**
|
62
|
0
|
63
|
27
|
а)29
б) 67
|
0
|
0
|
18
|
|
VI
|
24
|
48
|
0
|
22
|
0
|
11
|
0
|
0
|
2
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
VII
|
12**
|
48
|
0
|
70
|
18
|
а)25
б) 70
|
0
|
0
|
10**
|
|
VIII
|
4
|
47
|
0
|
72
|
9
|
а) 5
б) 73
|
0
|
0
|
7
|
|
IX
|
9
|
40
|
0
|
62
|
8**
|
а) 9
б) 61
|
0
|
0
|
0
|
|
X
|
31
|
40**
|
6
|
71
|
44
|
а)42
б) 68
|
5
|
2
|
16
|
|
XI
|
33*
|
34**
|
0
|
64
|
30
|
а)34
б) 55
|
4
|
3
|
16
|
|
XII
|
32
|
27
|
19
|
28
|
20
|
а)24
б) 43
|
0
|
0
|
5
|
|
XIII
|
17**
|
14
|
7
|
50
|
37
|
54
|
0
|
2
|
12
|
|
XIV
|
12**
|
13
|
7
|
13
|
11
|
а)25
б) 70
|
0
|
0
|
33
|
|
XV
|
4
|
4
|
0
|
20
|
0
|
а) 9
б) 20
|
0
|
0
|
3
|
Примечание: * - доверительный
интервал не превышает ± 3 · 10-2 ** - в указанных системах площадь пятен анализируемых веществ S ≥ 20 мм2 Кофеин-бензоат натрия – а) кофеин; б) бензоат натрия.
Заключение. Проведенные предварительные экспериментальные и теоретические исследования
позволили разработать методики идентификации лекарственных форм, содержащих бендазола гидрохлорид
и папаверина гидрохлорид в присутствии других ингредиентов. При идентификации проводили сравнения
величин Rf ингредиентов лекарственных форм с табличными (Таблица 6) и с данными полученными для
изучаемых веществ в тех же условиях (свидетели).
Список литературы
1.
Рощина Л.Л. Выявление условий хроматографического поведения папаверина гидрохлорида и бендазола гидрохлорида в присутствии ряда лекарственных веществ методом тонкослойной
хроматографии (ТСХ) (статья) Материалы Международной научно-практической конференции "Диалог наук
в XXI веке".-Уфа: РИО ИЦИПТ, 2014.- С. 41-47
2.
Сумина Е.Г., Штыков С.Н.,
Сорокина О.Н., Петракова А.В.,
Угланова В.З. Тонкослойная хроматография флавоноидов на силикагеле в модифицированных мицеллярных подвижных фазах на основе додецилсульфата натрия.- «Сорбционные и хроматографические
процессы», 2014.- Т.14, Вып.1.- С. 52-64.
3. Reich E., Widmer V. Thin Layer
Chromatography //
Ullmann's
Encyclopedia
of Industrial Chemistry. — Wiley, 2012. — DOI:10.1002/14356007.b05_301.pub2
©
Рощина Л.Л, Миронова О.А., 2017
