21 мая 2017г.
Активная выработка прооксидантных энзимов, провоцируемая изменениями метаболических процессов, происходящими на клеточном или субклеточном уровнях, способствует интенсификации свободнорадикального окисления и процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ) при системной красной волчанке (СКВ) [3]. Антитела к ферментам антиоксидантной системы (АОС), с одной стороны, могут являться одной из возможных причин их функциональной недостаточности, а с другой стороны антитела к ферментам-прооксидантам, таким как ксантиноксидаза (КО), могут усиливать их действие, вследствие их конформационного изменения [1].
Цель исследования: изучение процессов антителогенеза к КО и выявление связей изучаемых антител с клинико-лабораторными особенностями СКВ.
Материалы и методы.
Под наблюдением находились 60 больных с достоверным диагнозом СКВ (средний возраст 36,32±15,27 лет, средняя продолжительность заболевания 7,96±7,35 лет; женщин – 91,7%) с различными клиническими проявлениями (активность SLEDAI 8,93±5,74; активность ECLAM 5,30±2,79; индекс повреждения SLICC/ACR 1,95±1,71). Абсолютное большинство больных получали кортикостероиды, медиана дозы (в пересчете на преднизолон) составляла 20 мг/сут. Поражение почек было крайне разнообразно и выявлялось у 24 (40%) больных СКВ. У подавляющего большинства (15 человек) волчаночный нефрит развился в течение первых 6 лет от начала заболевания, у 12% больных поражение почек было первым проявлением СКВ. Разнообразная почечная патология варьировала от стойкой невыраженной протеинурии и микрогематурии до быстро прогрессирующего гломерулонефрита.
В контрольную группу вошли 30 практически здоровых лиц в возрасте от 18 до 40 лет (20 женщин и 10 мужчин), прошедших обычное медицинское обследование. Средний возраст лиц контрольной группы составил 26,0±5,6 лет.
Для определения антител к КО (анти-КО) в сыворотке крови использовали традиционный вариант иммуноферментного анализа (ИФА), а также разработанный нами вариант ИФА с применением антигенных наносистем (АНС). АНС, полученные методом эмульсионной полимеризации в потоке газообразного азота, представляли собой двойные полиакриламидные микрогранулы размером 10-100 мкм с иммобилизированным в их структуру антигеном (КО). В качестве антигена использовали коммерческий препарат ксантиноксидазы (ЕС 1.1.3.22; «Sigma», Cat. № Х 2252).
Результаты и обсуждение.
При применении ELISA-теста с использованием АНС повышенные уровни анти-КО были отмечены у 53,3% больных СКВ. При обследовании больных СКВ по сравнению со здоровыми лицами обнаружено увеличение содержания анти-КО (М(SD): 0,131 (0,083) против 0,032 (0,022), p<0,001; дисперсионный анализ в варианте с неравными дисперсиями). У больных с низкой активностью СКВ анти-КО не выявлялись, в то время как у больных с умеренной активностью анти-КО определялись у 59% пациентов, а при высокой активности – у 71% больных СКВ.
Была отмечена положительная корреляция уровня анти-КО со значениями индекса SLEDAI (r=0,322, р=0,016), индекса ECLAM (r=0,331, р=0,013), уровнем ЦИК (r= 0,297, р=0,024), а также обратная корреляция с уровнем гемоглобина (r= - 0,286, р=0,042), числом лимфоцитов (r= - 0,29, р=0,033) и тромбоцитов (r= - 0,308, р=0,028) крови. Полученные результаты могут свидетельствовать о непосредственном воздействии данных аутоантител на клетки крови. Кроме того, уровень анти-КО обнаруживал отрицательную корреляцию умеренной силы с биохимической активностью ксантиноксидазы в сыворотке крови больных СКВ.
Сравнение между собой групп больных СКВ, позитивных и негативных по наличию анти-КО, продемонстрировало статистически достоверное увеличение частоты выявления признаков поражения почек (28,3% против 11,7%; р=0,032).
Наряду с этим у пациентов с признаками поражения почек в сравнении со всей группой больных СКВ были отмечены более низкие значения активности ксантиндегидрогеназы (КДГ, D-форма фермента) (4,88±1,19 и 6,73±1,52, соответственно; р<0,001) и повышенный уровень анти-КО (0,218±0,084 и 0,151±0,062, соответственно; р=0,014). Высокий уровень анти-КО у больных с клинико-лабораторными признаками поражения почек сочетался с увеличением коэффициента КО/КДГ (с поражением – 2,46±1,81, без поражения – 1,70±0,68, р=0,039). Обнаруженные особенности, вероятно, отражают процесс разрушения клеток почечной ткани, выхода КО (О-форма фермента) в кровеносное русло, активного антителообразования к данному ферменту и усиления процессов трансформации КДГ в КО.
Нефропатия является одним из самых грозных осложнений основного заболевания, так как влечет за собой, как правило, развитие почечной недостаточности [4]. Учитывая, что при поражении почек при СКВ происходят значительные изменения пуринового метаболизма, нарушение почечной экскреции мочевой кислоты может приводить к выраженной гиперурикемии и образованию кристаллов уратов, имеющих сродство к протеогликанам хряща, синовии и сосудов, что обеспечивает в дальнейшем их непосредственное поражение.
Диагностические трудности вызывают, как правило, больные с поражением почек без иммунологических и морфологических признаков СКВ в первые годы заболевания [2]. Поэтому, совместное определение активности КО, КДГ и антител к ксантиноксидазе в качестве дополнительных диагностических критериев может дать дополнительную информацию при разграничении отдельных клинических форм СКВ.
Выводы.
Изменение энзиматической активности КО, отмечаемое в сыворотке крови больных СКВ, может быть связано не только с влиянием окислительных процессов и метаболических нарушений, но также и с гиперпродукцией антител к данному энзиму. Изучение клинических корреляций анти-КО позволяет улучшить диагностические подходы и детализировать роль данных антител в повреждении почек при СКВ.
Список литературы
1. Александров А.В., Алехина И.В., Александрова Н.В., Ненашева Н.В., Емельянова О.И., Емельянов Н.И. Роль антител к ксантиноксидазе в диагностике системной красной волчанки с лабораторными признаками антифосфолипидного синдрома // В сборнике: Основные проблемы в современной медицине. Сборник научных трудов по итогам международной научно-практической конференции. – 2015. – С. 171-173.
2. Александров А.В., Алехина И.Ю., Шилова Л.Н., Александрова Н.В., Ненашева Н.В., Емельянов Н.И., Мозговая Е.Э., Александров В.А., Емельянова О.И. Новые возможности использования антител к ксантиноксидазе и гуаниндезаминазе для выделения клинико-иммунологических вариантов системной красной волчанки // Современные проблемы науки и образования. – 2016. – № 3.; URL: https://www.science-education.ru/ru/article/view?id=24616 (дата обращения: 13.04.2017).
3. Зборовская И.А., Рогаткина Т.Ф., Мякишев М.В., Мартемьянов В.Ф., Стажаров М.Ю., Бедина С.А., Мозговая Е.Э. Активность антиоксидантных энзимов в лимфоцитах, эритроцитах и плазме крови больных системной красной волчанкой // Современные проблемы науки и образования. – 2013. – № 6.; URL: https://www.science-education.ru/ru/article/view?id=11161 (дата обращения: 13.04.2017).
4. Краснова Т.Н. Поражение почек при системной красной волчанке: современные представления о патогенезе, клинике, подходы к лечению // Современная ревматология. 2008; 2(3): 18-21. DOI:10.14412/1996-7012-2008-483.
