12 марта 2016г.
Изучение функционального состояния тромбоцитарного звена гемостаза привлекает внимание многих научных групп [2, 3, 4, 5, 7]. Известно, что тромбоциты являются важным элементом поддержания гомеостаза внутренней среды в целом и системы крови в частности. Видную роль в этом играет их агрегационная активность, обеспечивающаяся во многом за счет синтеза в них большого количества биологически активных веществ. При развитии различных отклонений от физиологического состояния в тромбоцитах нередко страдает синтез гемостатически значимых субстанций с усилением выработки проагрегантных факторов, что существенно нарушает реологические свойства крови [6].
Кроме того, изучение расстройств гемокоагуляции у животных полезно и важно не только для изучения патогенеза, лечения (в том числе и хирургического) подобных заболеваний у людей, но и для получения субстратной плазмы для определения факторов коагуляции в плазме человека.
Цель и задачи исследования.
С целью пополнения фундаментальных знаний по функционированию системы гемостаза у овец были поставлены следующие задачи:
· изучить агрегационную активность тромбоцитов у овец при индукции АДФ в условиях фермерского хозяйства;
· изучить агрегационную активность тромбоцитов у суягных овец при индукции АДФ в условиях учебного вивария;
· сравнить агрегационную активность тромбоцитов у овец на разных сроках суягности и в послеродовый период;
Материалы и методы исследования. Объектом исследования служили овцы романовской породы различного возраста и пола. Было создано несколько групп животных.
В первую группу вошли овцы на ранних сроках беременности (n=10), содержащиеся в условиях КФХ Механиковой М. В, Вологодский район.
Во вторую группу вошли овцы на поздних сроках беременности (n=2; 2а – до родов, 2б – после родов), содержащиеся в условиях учебного вивария факультета ветеринарной медицины и биотехнологий ФГБОУ ВО Вологодской ГМХА.
Кровь, взятую из яремной вены у животных, стабилизировали цитратом натрия в соотношении 1:9 в пластиковые пробирки.
Агрегационную активность тромбоцитов определяли с помощью фотоэлектроколориметра КФК-2 по Howard M. A. с использованием активатора свёртывания АДФ. Метод основан на фотометрическом определении изменений процента светопроницаемости (оптической плотности), которые происходят в обогащенной тромбоцитами плазме в результате образования агрегатов при агрегации тромбоцитов [1].
У овец определяли суммарный индекс агрегации тромбоцитов (СИАТ), скорость агрегации (СА), индекс дезагрегации тромбоцитов (ИДТ).
Результаты исследования и их обсуждение. Поддержание нормального гемостаза невозможно без участия тромбоцитов, для которых это является одной из основных функций. Для эффективного осуществления гемокоагуляционных процессов имеет значение не только количество кровяных пластинок в циркуляции, но и их функциональная активность [2, 3, 4, 5, 7].
Естественным индуктором агрегации тромбоцитов является АДФ. Действуя через пуринорецепторы тромбоцитарной мембраны, АДФ активирует тромбоциты, стимулируя резкое увеличение внутриклеточного Са2+ [7, 8, 9, 10]. Различия в степенях агрегационной активности тромбоцитов у овец на разных сроках суягности и после окота выявлялись в исследованиях АДФ-зависимой агрегации (Рисунок 1).
Анализируя полученные результаты мы можем видеть,
что на ранних сроках беременности у овец имеет место увеличение скорости агрегации
тромбоцитов под влиянием АДФ. Это совпадает
с медицинскими исследованиями: повышенная агрегация
тромбоцитов на АДФ и
другие индукторы может иметь место на ранних сроках беременности.
На поздних сроках суягности
мы получили значительное снижение скорости
агрегации тромбоцитов. Это может являться как видовой
особенностью, так и адаптивной реакцией тромбоцитов, позволяющей повысить реологические свойства крови, для улучшения питания плода.
После окота скорость агрегации
тромбоцитов увеличилась, однако была ниже, чем на ранних сроках беременности.
При этом, несмотря на существенные колебания
скорости агрегации тромбоцитов суммирующий индекс их агрегации не имел значительных различий,
как на протяжении всего периода суягности, так и после родов.
Индекс дезагрегации возрастал с увеличением сроков беременности овец и максимальных значений достигал после родов.
Таким образом,
исходя из полученных результатов, можно заключить, что на ранних
сроках суягности особенностью реакции
тромбоцитов является АДФ-индуцированная гиперагрегация, на поздних сроках суягности – гипоагрегация и после родов – нормализация агрегационных свойств тромбоцитов.
Список литературы
1.
Берковский
А.Л. и др. Пособие
по изучению
адгезивно-агрегационной
активности
тромбоцитов. - М: НПО «Ренам».,
2003. - 29с.
2.
Мазуров, А.В. Мембранные гликопротеиды в реакциях адгезии
и агрегации тромбоцитов: Дис…. докт. мед. наук. М. - 1998. - 216 с.
3.
Медведев И.Н. Физиологическое становление тромбоцитарного гемостаза у продуктивных животных
в постнатальном онтогенезе: Диссертация ... доктора биологических наук : 03.00.13 - Курск, 2008.- 402 с.
4.
Ошуркова Ю.Л. Состояние тромбоцитарного
звена системы гемостаза
у лактирующих коров / Ошуркова Ю.Л., Фомина Л.Л., Соболева
Е.Н. // Молочнохозяйственный вестник. 2011. № 1. С. 20-22.
5.
Ошуркова Ю.Л. Агрегационная активность
тромбоцитов у здоровых собак в
условиях севера Европейской части России
/ Ошуркова Ю.Л.,
Баруздина Е.С., Горева
И.А. // Наука и Мир. 2014. № 7 (11). С. 20-22.
6. Рубцова Е.А. Роль тромбоцитов в гемостазе / Рубцова Е.А., Ошуркова
Ю.Л., Фомина Л.Л. // В сборнике: Научное обеспечение - сельскохозяйственному производству. Биологические науки. Международная научно-практическая конференция, посвященная 99-летию академии.
2010. - С. 129-132.
7.
Ardlie, N. G. Adenosine
diphosphate-induced platelet aggregation in suspensions of washed
rabbit platelets / N. G. Ardlie, M. A. Packham, J. F. Mustard
// Br. J. Haematol. 1970. - Vol. 19. - № 1. - P. 7 - 17.
8.
Born, G. V. Aggregation of blood platelets by adenosine diphosphate and its reversal
/ G. V. Born // Nature.
1962. - Vol. 194.
- P. 927 - 929.
9.
Gachet, C. Platelet activation by ADP: the role of ADP antagonists / C. Gachet//Ann. Med. 2000. - Vol. 32 (Suppl 1). - P. 15 - 20.
10. Jarvis, G. E. ADP can induce
aggregation of human platelets via both P2Y(1) and P(2T) receptors
/ G. E. Jarvis,
R.G. Humphries, M. J. Robertson, P. Leff// Br. J. Pharmacol. 2000. - Vol. 129. - № 2. - P. 275 - 282.
